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유전자 재조합 기술
Prokaryotes
Eukaryotes
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Eukaryotes
본문내용
의 합성이 확인되면 그 mRNA를 reverse transcriptase로 cDNA를 만들고, 알칼리 처리로 RNA를 제거한 뒤 한 가닥 사슬로 되어 있는 cDNA를 template로 하여 DNA dependant polymerase를 이용해 2가닥의 사슬로 된 cDNA를 합성한다. 이렇게 해서 된 cDNA는 원래의 genonaic DNA와 달리 intron은 존재하지 않는다. 이와 같이 거의 순수하게 유전정보를 갖고 있는 cDNA를 합성한 뒤 plasmid 등의 vector에 끼워 bacteria에 도입한다. Bacteria는 체내에 들어온 이종 DNA의 유전정보를 그대로 발현하여야 하는데, 대개 이를 검정하기 위하여 gene vector에 유전적 표지, 즉 항생제에 대한 저항성, 영양요구형 또는 plaque 형성 등을 이용한다. 최종 생성물질을 선별하기 위해서는 일반적으로 radioimmunoassay 또는 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 방법을 이용한다. 근래에 잘 알고 있는 사람의 insulin, interferon 또는 somatostatin 등은 이런 방법에 의해서 생산이 시도되고 일부 성공하고 있다.
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