GST-fusion protein purification

목차

1. 실험제목

2. 날짜

3. 목적

4. 이론

5. 재료

6. 실험방법

7. 결과

8. 고찰

9. 숙제(further study)

본문내용

Cl-이온과 glycine-이온 사이에 매우 높은 전압차가 형성된다. 이때 상대적인 이동속도는 glycine- < 단백질 < bromophenol blue < Cl-이 된다(Cl-는 작기 때문에 빠르고, 단백질은 glycine보다 크지만 음전하가 많아서 빠르다). 모든 단백질은 acrylamide 농도가 낮은 gel에서 움직임의 제한을 받지 않고 높은 전압차에 의해 빠르게 이동하지만, Cl-이온 앞쪽이나 glycine-이온 뒤쪽으로는 높은 전압이 없으므로 이 사이(얇은 disc)에 모두 모여 이동되는 셈이다. 이들이 resolving gel에 도달하면 이곳에서 glycine은 높은 pH로 인해 거의 모두 음전하가 되어 위와같은 효과는 사라지고, 또한 acrylamide의 농도가 높기 때문에 단백질은 크기에 따라서 분리가 시작되게 된다.
2)
10.Reference
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/protein_purify_ep.php
http://www.bris.ac.uk/bhi/mark/western.html
http://www.fiu.edu/~animals/gel_solutions.html

키워드

Disc gel 전기영동,   Western blot,   protein purification,   단백질 정량,   glutathione