[분석실험] HPLC 분석 (고성능 액체 크로마토그래피)

소개글

[분석실험] HPLC 분석 (고성능 액체 크로마토그래피)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험목적

2. 실험재료 및 방법
(1) 실험재료
(2) 실험방법

3. 실험 결과

4. Discussion

5. Reference

본문내용

고압 작동이 가능 (6000 psi)
- 가동이 쉽고 다양한 용매에 내구성 - 경제성, pulse가 없어야 함
- 재현성과 0.5% 이하의 유속 조절 - 용매에 대해 화학적 불활성
- 기울기 용리가 가능해야 한다.
위의 요건을 만족하는 펌프로서 가장 많이 쓰이는 것은 왕복 피스톤형 펌프이며, 그 구조는 위의 그림과 같다.
▣ Sil-C18 의 특성( 우리가 실험에 사용한 column)
C18(octadecyl=ODS) : Si-C18H37
- 전통적인 역상의 고정상으로 흔히 사용되어 왔으며, 거의 모든 유기화합물에 대해 응용범위를 가진다. 또한 ion-pairing chromatography에 유용하며, 300A의 pore size를 가진 silica에서 hydrophilic peptide를 분석할 때 이상적이다.
▣ detector의 조건
- 높은 감도 - 빠른 감응 속도
- 넓은 dynamic range - 용매의 증류나 유속, 온도에 민감하지 않음
- 여러 물질에 대해 사용 가능 - 시료를 파괴하지 않아야 함
우리는 UV 검출기를 사용했으며 가장 흔히 쓰이는 검출기인 UV 검출기와 RI 검출기의 특성은 다음과 같다.
UV 검출기의 특성
RI 검출기의 원리 와 특성
UV 검출기의 종류 :
① 수은 방전관 검출기 : 흡수광이 한 파장, 즉 254nm나 280nm로 고정되어 있음.
② 중수소 방전관의 UV 검출기 : 흡수광을 원하는 파장으로 조정할 수 있음.
① 모든 시료에 대해서 검출이 가능하다.
② 감도는 약 10-6g 정도로서 UV 검출기에 비하여 작다.
③ 기울기 용리에는 사용할 수 없다.
④ 온도에 예민하다.
⑤ 대규모 분리에 적합
① 감도가 10-6～10-10g으로 크다.
② 시료에 따라 선택성이 있다.
③ 기울기 용리에 적용이 가능하다.
UV 검출기의 경우에는 시료에 포함된 각 성분이 검출기에서 방사되는 파장의 빛을 흡수해야만 가능하다.
순수한 용매만의 굴절률과 컬럼을 통해 나오는 용액의 굴절률의 차이가 검출되어 기록되는 것으로 특히 GPC에 적당하다.
5. Reference
1. David Harvey, 박면용외 역, Modern Analytical Chemistry, 녹문당, 2001, p.543∼621
2. 이용근외 5인, 분석화학, 4th Edit, 희중당, 1992, p.157∼201
3. http://hplc.chem.shu.edu/HPLC/index.html

키워드

HPLC,   detector,   Sil-C18 ,   액체크로마토그래피,   UV 검출기