배지 베조와 멸균

목차

Title

Purpose

4. Material

5. Method

6. Result

7. Discussion

<참고자료>

본문내용

반드시 멸균기내 압력이 떨어졌는가를 확인하고 뚜껑을 열지 않으면 화상을 입는 경우가 많으므로 조심하여야 한다.
가열은 내용물에 따라 적절히 변화시켜야 한다. 예를 들면 수 십~수백 ml 정도의 배지는 설정 온도에서의 멸균 시간을 15분으로 셋팅하면 충분하나 수 liter의 배지는 15분으로 내부까지 열이 충분히 전달될 수 없으므로 30분 또는 그 이상의 시간이 필요하다.
또한 포화 수증기가 되지 않으면 멸균 효과가 떨어진다. 따라서 종류에 따라서는 증기가 내부로 쉽게 침투할 수 있도록 하여 멸균할 필요가 있다. 예를 들어 빈 삼각 플라스크를 멸균할 경우에는 물을 넣어 내부에 증기가 발생되는 상태로 멸균하고 멸균한 수 건조기에서 물을 제거하고 사용한다.
또한 배지를 스크류 캡에 넣어 멸균할 때에는 마개를 약산 열어 멸균하고 식은 후 마개를 닫아 가열시 팽창에 의한 파손 및 마개를 열 때 외부 공기 유입에 의한 오염을 방지한다. 멸균 대상물을 고압 증기 멸균기 내에 넣고 뚜껑을 닫은 다음 가열한다. 멸균기 내의 공기는 배기 구명을 통하여 완전히 배기시키고 배기구를 닫는다. 멸균이 끝난 후 증기는 서서히 뺀다. 가열로 변질될 우려가 있는 것은 멸균 온도와 압력을 낮추거나 시간을 단축한다.
<여과멸균>
대상으로 하는 미생물의 크기보다 작은 구멍이 뚫려 있는 막이나 체를 이용한 멸균법이다. 액체나 기체의 멸균에 이용된다. 멸균이란 세균·홀씨·곰팡이 및 바이러스 등 미생물을 사멸시켜 살아 있는 생명체가 검출되지 않는 무균상태를 말한다. 혈청이나 알루미늄 용액 또는 특수한 배양액 등 고온에서 변성하거나 분해하는 것은 여과멸균에 의해 세균이나 곰팡이 등의 멸균을 한다. 그러나 바이러스의 경우 멸균용 필터를 통과하기 때문에 제거하기 어렵다.
멸균용 필터는 일반적으로 멤브레인(membrane) 필터를 사용한다. 이는 고압증기멸균이 가능하다. 여과멸균기의 종류로는 흡인형(吸引型)과 압출형(壓出型)이 있으나, 배양액의 여과에는 압출형을 사용하는 것이 좋다. 흡인형의 경우, 흡인에 의해 이산화탄소가 소실되어 PH가 변하고, 또한 음압 때문에 혈청이나 기타 짙은 단백질용액에서 거품이 생겨 그 표면에 변성이 일어나기 쉽기 때문이다.
<참고자료>
미생물학실험, 민찬옹외3명 , 을유문화사, 1993, 32-33
미생물학실험서,삼일각, 김종협외2명 ,1976, 21-22
최신미생물학실험, 박석기외5명, 신광문화사 , 2001, 61-64

키워드

배지 제조,   액체배지,   고체배지,   멸균