Western blot

소개글

Western blot에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Introduction “western blot에 대해..”
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussion
5. Note
6. Reference - 각주 참고

본문내용

d 정량방법은 Coomassie Blue G 염색약이 단백질과 결합함으로서 생기는 파장의 변화를 측정(단백질에 있는 아르기닌과 aromatic 잔기에 결합된 anion form의 이온을 통해 595㎚에서의 흡광도를 측정)하는 것입니다. 장점으로는 정량시간이 매우 빠르고 간단하다는 데 있습니다. 그러나 단백질이 아닌 다른 것들 Detergent, 지방 등에 의해 간섭을 많이 받는 단점이 있으며 단백질마다 Coomassie Blue G 염색약과 결합하는 정도가 조금씩 다를 수 있는 단점이 있습니다.
(2) 단백질 정량
단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정인데, 이번 실험에서 우리가 한 단백질 정량에 대해 간단히 설명하고자 한다. 표준을 uv 595nm 일 때, OD값(흡광도) 0.5 => 단백질 0.5ug라 두었다.(이것은 통상적인 표준이 아니고, 우리 학교 실험실에서 가장 적정한 조건을 측정한 것이라고 한다.)
우리가 protein 20ug을 넣어야 하는데 이 때 넣어야 하는 부피를 계산하면,
OD값
protein
control
0.402=>4.02
1 조
0.421=>4.21
2 조(우리조)
0.425=>4.25
4.7
3 조
0.439=>4.39
4 조
0.385=>3.85
2조를 살펴보면, 표준 : OD값 0.5 -> protien 5ug/ul
우리 측정한 : OD값 0.425 -> protein 4.25ug/ul
protein 20ug을 넣어야 하므로, 20ug : X ul = 4.25ug : 1ul So, X ≒ 4.7ul
6. Reference - 각주 참고

키워드

Western blotting ,   Western blot ,   protein detection,   FAF1