계란 노른자로 부터 막지방질, pc 추출 (예비보고서)

소개글

계란 노른자로 부터 막지방질, pc 추출 (예비보고서)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
① 생체막
② 지방질(Lipid)
③ PC(Phosphatidyl Coline)
④ 계란의 구조
3. 시약 및 기구
4. 실험방법

본문내용

이 여과지를 다 빠져 나갈 때까지 전개용매는 sea sand와 여과지의 중간에 있도록 스포이트로 전개용매를 아주 조금씩 넣어준다. Column의 cock은 잠그지 않고 열어둔다.)
★주의! 전개 용매의 윗선이 거름종이 아래의 silicagel까지 내려와서는 안 되며 column이 깨지지 않도록 한다.
⑥ 전개용매 소량을 먼저 기벽에 흘려보낸 뒤 5cm 정도 되면 column 높이까지 전개용매를 첨가하고 roading 시킨다.
(→ 전개용매가 휘발되지 않도록 column 입구를 은박지로 덮어둔다.)
⑪ Column에서 떨어지는 용매를 50mL 삼각플라스크에 20mL씩 받는다.
(→ 50mL 삼각플라스크 20개 정도)
⑫ TLC 상으로 PC와 같은 위치의 spot이 나온 용매를 250mL 1구 둥근 플라스크에 모두 옮긴 후 evaporation으로 용매를 날리면 순수한 PC만을 추출할 수 있다.
(→ 하얀색 결정 또는 약간 투명한 gel 형태)
⑬ 용매를 모두 날리고 나온 흰색의 PC는 labeling을 하여 은박지로 입구를 막아 냉동 보관한다.

① 삼각플라스크에 받은 용매를 TLC판 아래에서 1cm 떨어진 곳에 연필로 선을 긋고 모세관을 이용하여 선위에 spot을 찍는다.
② Spot을 찍은 부분이 닿지 않도록 chamber에 TLC판을 넣는다.
(전개용매를 chamber 안에 포화시키기 위해서 chamber에 여과지를 기벽의 2/3를 두른다.)
③ 전개용매(chloroform:EtOH(또는 MeOH):H20=65:25:4)가 TLC판의 위쪽 끝부분 0.5cm까지 전개되면 TLC판을 핀셋으로 꺼내어 드라이기로 말린다.
④ 말린 TLC판을 KMnO4 chamber에 바로 넣었다 빼어 드라이기로 말린다. (→ 이 때 PC의 지방산 사슬의 이중 결합 부분과 KMnO4가 반응하여 노랗게 착색)
⑤ 약 2~3분후 노란색의 spot이 나타나며 이 부분을 연필로 표시하고 사진을 찍거나 그림을 그린다.
* 참고그림

① TLC 찍을 때 항상 reference를 옆에 찍고 시작한다.
② TLC 찍을 때 모세관에 수용액 층이 나오면 모세관을 버린다.
③ TLC에 spot을 찍고 수분이 있을 수 있으므로 드라이기로 건조시킨 후 전개시킨다.
(→ 수분이 있으면 전개용매의 수분 비율이 달라지기 때문에)
④ 전개용매가 투명하지 않고 뿌옇게 되면 알코올을 조금씩 첨가하여 투명해지도록 한다.

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