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5ml 멸균된 LB medium에서 overnight 한다(37℃에서 최소한 mid-log phase 까지 배양한다).
2. 1.5ml의 종배양액을 1.5ml microcentrifuge tube에 옮기고 원심분리하여 cells을 모은다 (pellet). 상등액을 제거한다.
3. 200㎍ lysozyme이 든 STET soln. 300㎕에 pellet을 녹인다.
4.
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ac.kr/biochem_workshop/restriction_enzyme.php
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php 1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험원리
1) 플라스미드의 정의
2) Plasmid의 특징
3) 플라스미드 분리 및 정제 방법
4)PCR
5) 제한효소
6) ligation of DNA
4
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DNA와는 별도로 존재하기 때문에, plasmid DNA 분리는 염색체 DNA가 포함되지 않게 분리하는 방법이 사용된다.
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
나노헬릭스, Reliable Partner for DNA Technology, 플라스미드 (Plasmid) DNA 분리, 2013.12.03
https://m.blog.naver.com/nanohelix/7018038572
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DNA사슬의 특정 염기배열부위를 절단하는 효소를 제한효소라 하고, 같은 제한효소로 절단된 2종의 DNA사슬은 절단면의 구조가 상보적이며, 이들이 결합해 형성된 분자를 재조합DNA라 한다. 유전자DNA와 세포질에서 자기증식하는 플라스미드DNA
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플라스미드
(2)기본적 특징
(3)플라스미드의 분류
(4)세균 이외의 생물에 있는 플라스미드
2. Materials
3. Methods
(1)플라스미드 DNA 정제 순서
(2) Identification of plasmid DNA by agarose gel electrophoresis
4. Result
5.Discussion
(1)실험 과정에 대한 고
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유전자를 분자유전학적인 방법으로 분리 또는 합성하여 유전자를 재조합하거나 재조합된 새로운 유전자를 세균 등에 도입하여 특정한 생물활성물질을 다량으로 저렴하게 생산하게 할 수 있어서 이미 선진국들은 이의 실용화를 위하여 크게
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DNA이고, 많이 이동한 오른쪽 DNA 가 제한효소 처리를 하지 않은 자연상태의 초나선구조 DNA 이다.
Ⅳ. 참고문헌
-「생화학」, Karlson, 김태봉역, 탐구당, 1985, p72.
-「생물학 개론」, 안상태, 화학사, p136-140.
-「Duplex SDS-PAGE를 이용한 단백질 분리향
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plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되
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