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Stacking gel
Stacking gel 상에서 Cl-와 glycine간의 이동속도 차이는 두 이온 사이에서 발생하는 high voltage gradient의 영향을 받음
이 두 이온 사이의 전기장이 또 한번 생김으로 두 이온 사이에 놓인 단백질들은 분자량의 차이에 의한 이동속도의 차이
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1. Subject
SDS-PAGE ( Sodium Dodecyl SulphatePolyacrylamide Gel Electrophoresis )
SDS와 Polyacrylamide 를사용한전기영동
2. Purpose
전기영동을 통해 원하는단백질의유무확인하고, 분자량을이미알고있는단백질과비교하여분자량산출하기 위해 사용한다.
3. Mater
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자량의 불순물을 제거하는 데 사용된다.
단백질이 점점 더 정제될수록 더욱 정교한 정제방법이 동원되는데, 크로마토그래피(chromatography)와 전기영동(electrophoresis)등이 여기에 해당한다.
크로마토그래피(chromatography)
크로마토그래피는 단백질
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전기영동 실험 방법
(1) 장비
(2) supporting medium의 특징, 선택 및 조제
1) paper
2) Cellulose Acetate
3) Thin layer electrophoresis(t.l.e.)
4) block electrophoresis
5) gel
① 전분
② 한천
③ Polyacrylamide
(3) 실험 순서
1) Medium saturation
2) samp
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전기영동 실험 방법
(1) 장비
(2) supporting medium의 특징, 선택 및 조제
1) paper
2) Cellulose Acetate
3) Thin layer electrophoresis(t.l.e.)
4) block electrophoresis
5) gel
① 전분
② 한천
③ Polyacrylamide
(3) 실험 순서
1) Medium saturation
2) samp
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ote인지, homozygote인지를 구별 할 수 있었다.
실험이 성공적으로 이루어져 깔끔한 상태의 결과를 확인할 수 있었고, 어떤 것이 자식 오염주인지 전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의
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전기영동 이동거리로 분석한 결과와 일치한다.
agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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영동전기(주)에 대한 재무제표 및 기업정보를 중심으로 분석한 상세보고서(종합신용등급, 현금흐름등급, Watch등급, 기업개요, 주요재무상황, 주요재무비율, 재무신용평정, 신용도 분석의견, 기업현황, 주요 주주현황, 경영진현황, 관계사현황,
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