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olet 용액을 1~2방울 가한뒤 3분간 방치한후 염색약을 버리고 물로 씻는다 (washing 세척)
(6) 95% ethyl alcohol로 30초 동안 탈색후 물로 씻는다. 탈색 과정이 매우 중요한 과정이므로 주의해야 한다
(8) Safranin으로 30초간 대조 염색한 후 물로 씻는다
(9)
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mp에 멸균하여 식힌 후 약간의 균주를 묻혀 dH2O와 골고루 섞고 도 말 한 다 .
3. 공기 중에 1분 건조시킨 후 열 고정 하기 위해 alcohol lamp의 불꽃을 2~3회 빨리
통과시킨다.
4. 열 고정한 slide glass를 crystal violet으로 덮고 60초간 놓아둔다.
3. 흐르는
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Crystal violet), 자일렌
5.실험방법
①. 세균이 배양된 배지를 준비한다.
②. 알코올램프에 불을 켠 후 백금이를 멸균한다.
③. 백금이로 배양된 각각의 세균을 살짝 컷팅하여 슬라이드글라스위에 얇게 도말한다.
④.각각의 세균이 도말된 슬라이
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Crystal violet 1분
2. Gram\'s Iodin 1분
3. 95% Ethanol
4. Safranin 30초
관찰 배율
(접안렌즈15*대물렌즈100)=1500배
색깔
분홍색
관찰 결과
Gram 음성
1. 그람염색 결과
그람염색
그람염색후 관찰하였을때 분홍색으로 염색된 미생물만 보였으며 보라색으로 염색
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crystal violet을 흡수하여 보유하는 성질을 가지고 있다. 이와 같은 세균을 Gram positive라고 부르며 보라색을 띈다. 이와는 달리 얇은 세포벽을 가진 세균은 gram staining시에 crystal violet을 보유하지 못하기 때문에 Gram negative라고 하며, 붉은색을 띈다
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crystal violet-iodine-ethanol-safranin
세포가 보라색됨
그람 양성 - 보라색
그람 음성 - 알코올에 의해 무색으로 탈색되고, 사프라닌(마지막과정)으로 붉은색 됨
그람 음성균에만 외막이 존재함, 펩티도글리칸층 바깥에 有, 크 단백질, 항생제 투과 막
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