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실험
중합효소 연쇄반응의 의학적 응용
중합효소 연쇄반응은 다음과 같이 세 단계로 이루어진다.
1) DNA의 변성(denaturation)
2) Primer의 결합(annealing)
3) DNA의 합성(polymerization)
A. Genomic DNA로부터 특정 유전자 부위의 증폭
B. PCR의 응용
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될 때 복제분지점이 한 방향으로의 이동에는 문제점이 있는데 그 이유는 2중 나선형이 서로 반대방향으로 이루어졌기 때문이다. 또한 DNA중합효소는 DNA합성시 5‘에서 3’방향으로 합성해 나가는데 촉매작용을 하고 있다는 점이다.
DNA가 주형
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DNA
단일가닥을 SSB protein이 덮음
이중가닥 부위에 primase가 결합하여 primer를 합성함
DNA polIII가 SSB protein을 치환하면서 DNA를 합성함
DNA ploI이 RNA primer를 제거한 후 DNA로 채움
DNA ligase에 의해 틈을 메우고 복제가 완성됨
Ⅵ. DNA복제의 사례
1. 불연
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사슬과 지연사슬 모두를 만들기 위해 프라이머를 연장시키는 효소. 초당 약 700뉴클레오티드를 합성하기 때문에 DNA 중합을 거의 담당한다. polymerase Ⅲ 핵심복합체는 잘못 짝지어진 염기가 도입되는 순간 그것을 제거하는 3'→5'핵산외부가
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onuclease
A. 오카자끼 절편 합성 후에 프라이머를 제거하는데 사용된다.
12) Topoisomerase
A. 헬리카제가 DNA를 풀도록 도와주는 역할을 한다.
B. 2중 나선 DNA가 풀려지면서 생기는 긴장 및 양성 뒤틀림을 완화시켜준다.
C. DNA 고리 수를 변화시켜 과대
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