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측정하여 DNA의 농도를 산출한다. 한편 단백질이 강하게 흡수하는 280nm에서의 흡광도를 측정하여 A260/A280의 비를 계산함으로써 단백질에 의한 오염상태를 추정할 수 있다.
3) DNA electrophorosis
분리한 plasmid DNA를 agarose gel에서 전기를 걸어 분리
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DNA를 추출하여야 vector에 잘 삽입될 수 있게 해준다.
6. Reference
생화학 제 5판 . Marry K.Campbell 외 저. 곽한식 외 역. 라이프사이언스 2007
유전공학(제2판). James D. Watson 외 저. 박영순 외 역. 탐구당 2002
생명과학 속의 기초 유전자학 및 유전정보 활
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전기영동용 gel을 만들어 핵산의 분리 및 확인 등에 사용한다. 아가로즈의 분자구조는 galactose and 3,6-anhydrogalactose의 중합체로 되어 있으며, gel 화 하였을 때 전기적으로 중성인 망상구조를 가진다. 이 망상구조의 특성을 이용하여 주로 DNA나 RNA
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DNA가 침전되며 침전된 DNA를 적당한 완충용액에 녹임으로써 플라스미드 DNA를 정제할 수 있다.
혹은 이온 교환 크로마토 그래피 법을 이용하여 보다 순수한 plasmid DNA를 정제할 수도 있다. (Plasmid DNA 분리 &
농도 측정 &
electrophorosis
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법
1. plasmid isolation(Ammonium acetate 법
2. DNA Restriction (Vector 제작
3. pS44 DNA restriction
4. Electrophoresis
5. PCR (polymerase chain reaction
6. Elution ;Gene clean kitⅢ(Bio101
7. Ligation
8. Competent cell 제조 (DH5α) - CaCl2 법 사용
9. Transformation (Heat sh
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