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욱 증폭되었다. 따라서 위와 같은 연구의 첫 번째 과정은 DNA 추출로 많은 실험을 통해 최적의 상태로 추출할 수 있는 방법을 숙지하는 것이 중요하다.
V. Reference
1. Independent functions of viral protein and nucleic acid in growth of bacteriophage. Hershey A, Chase MJ
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DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
★ Bradford Assay
원 리
- Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phr 에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다
- dye는 6개의
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DNA의 농도를 측정하시오.
< 소 혈액에서 추출한 Genomic DNA의 O.D값 측정 결과 >
260nm
280nm
농도
순도
1
0.448
0.224
4.48
2.0
2
0.443
0.259
4.43
1.7
3
0.378
0.211
3.78
1.8
4
0.435
0.225
4.35
1.9
※ DNA 농도
260nm 측정치 × 희석비율(200배) × 50 ÷ 1000 = 농도 μg/μl
※ DNA
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는 것이 좋음
4. 실험결과
관찰결과 RNA가 완전히 제거되지는 않았으나 supercoiling DNA, open circler DNA, Linear DNA가 관찰되었다. RNA가 가장 빠르게 이동하였으며 크기가 가장 작은 supercoiling DNA가 그 뒤를, 그리고 open circler DNA 마지막으로 Linear DNA 순으
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DNA가 circular covalently closed(Supercoil)형태, Open circular형태, Linear형태로 되어있을 때 예상되는 전기영동 거리를 설명하라.
: DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 supercoiled DNA가 가장 빨리, 그다음 linear DNA, open circular DNA의 순으로
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DNA의 양은 528μg/ml이다. 반면, 단백질을 구성하는 아미노산 중 aromatic ring을 갖고 있는 thyrosine 이나 tryptophan은 280nm 의 빛을 흡수 하기 때문에 A260/A280의 비를 구하면 단백질이 얼마나 DNA에 오염되었나, 즉, DNA의 순도를 확인할 수 있는데 실험 결
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순도는 80%임을 알 수 있었고, 멜론 종자의 순도검정시 DNA mar
ker를 이용하여 검정할 수 있다는 결론도 얻었다.
5. References
- 농림수산식품부(2008) 수박ㆍ멜론의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수박 F1 종자
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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