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FACS로 assay한다.
Referencehttp://en.wikipedia.org/wiki/Isopropyl_alcoholhttps://en.wikipedia.org/wiki/TUNEL_assay
https://en.wikipedia.org/wiki/Giemsa_stain
https://en.wikipedia.org/wiki/Annexin_A5
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DNA의 용액 속에 단백질이 많이 포함되어 있거나 DNA를 elution한 buffer의 pH가 낮은 경우를 예상할 수 있다. 반면 높게 측정되었다면 RNA가 오염되었거나 DNA의 fragmentation의 문제점들을 예상할 수 있다. 260/230의 비율을 통한 DNA순도는 1.9~2.2 정도의
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omain (DD) 의 clustering
clustered된 CD95의 DD에 FADD(Fas-associated death domain)가 결합
FADD의 death effector domain (DED)에 caspase-8의 DED가 결합
caspase-8의 oligomerization은 self-cleavage를 통하여 스스로를 activation시킴
activated caspase-8이 downstream effector caspases를 활성
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법
- 준비된 DNA 시료를 loading dye와 섞어 gel에 넣는다.
- 100v로 40분간 전기영동을 실시한 뒤 UV하에서 DNA band를 확인한다.
4. 실험결과
Apoptosis가 일어날 때에는 chromatin이 응축되고, DNA fragmentation이 일어나게 되므로 전기영동을 해보면 ladder가 주로
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n의 compaction과 fragmentation이 일어나며, cytoplasm이 수축하고, DAPI의 투과성이 커지는 현상(light intensity가 증가)이 일어나게 된다.
6) 결론
DAPI staining은 DAPI라는 분자가 DNA에 binding하여 cyan 색의 형광을 나타내는 것을 이용한 nuclear chromatin 염색법으
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