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RT(reverse transcriptase) PCR이란?
RT-PCR이란 P.Seeburg(1986)에 의해 RNA를 찾고 분석하는데 도입된 방법으로 mRNA(messenger RNA)로부터 reverse transcription 과정을 통해 얻어진 cDNA(complementary DNA)를 PCR로 증폭하는 방법이다. 이러한 방법은 RNA 검사의 sensitivity를
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PCR 증폭 효율에 영향을 미치고 있다고 소개하고 있다. 또 다른 연구 “Validation of Zebrafish (Danio rerio) Reference Genes for Quantitative Real-time RT-PCR Normalization” (Tang et al, 2007)에서는 β-actin은 PCR 증폭에 용이한 길이와 GC 함량을 가진 유전자로 소개하고
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영양 생화학 실험
1. 주제 RT(Reverse Transcription)-PCR , PCR (polymerase chain reaction)
2.
재료
및
기구 기구 PCR, mini centri, PCR tube, e.p tube, incubator, micro pipette, glove, ice box.
시약 1) RT-PCR
DEPC, RNA sample, oligo dT, RT buffer, dNTP, RT enzyme., Thermal Cycler
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을 때, 생물검정법에서 양성 반응을 보이는 시료는 RT-PCR-ELISA법에서도 모두 양성 반응을 보이고 몇몇 생물검정법에서 음성반응을 보였던 시료에서도 양성반응을 보였다. ※ PCR (Polymerase Chain Reaction)
※ 효소 항체 결합법(ELISA)
※ RT-PCR-E
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DNA를 합성.
1-3.PCR의 이용
PCR의 이용
밝혀진 유전자의 검출
임상검사-암세포 유무의 진단
감염증-병원체 존재의 진단
태아의 성별 진단
법의학-개인의 특징 확인 1. PCR
2. RT-PCR
3. Real time-PCR
4. PCR의 응용
5. Western blot
6. 출처
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Spectrometry): 대사산물 분석
- UV-Vis Spectrophotometer: 미생물 성장 및 발효 산물 측정
2. 분자생물학 및 유전체 분석 기술
- qPCR 및 RT-PCR: 유전자 발현 분석
- CRISPR-Cas9: 미생물 유전자 편집
- NGS (Next-Generation Sequencing) 데이터 분석: 미생물 유전체 분
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