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실험 과정 동안 사용된 총 DNA양으로 나눈 값이다. Transformants는 주입된 DNA나 주입된 DNA에서 발현되는 gene을 말한다. Transformation으로 사용되는 competent cell의 Transformation efficiency는 보통 10^8transfomed colony/ug of supercoiled plasmid DNA 정도가 적당하다. Sup
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결과를 얻고 싶다면 1.0%보다 낮은 농도의 agarose를 사용하면 가능할 것으로 추정된다. (최적의 농도는 0.7%)
그리고 실험을 할 때는 전기영동이 ()극에서 시작할 수 있도록 조작해야한다. 그 이유는 전기영동은 agarose gel에 전류를 흘려보내 DNA를
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H.C. and Doly, J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Research 7, 1979, p.1513-1523
3) Joseph Sambrook, David W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001, p. 1.31-1.42, p.5.4-5.39 1. 서론
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가장 잘 형성하며, 구아닌(G)은 사이토신(C)과 수소결합을 가장 잘 형성한다. 이때 A는 T 에 상보적이고, G는 C에 상보적이라고 한다. 1. 실험 제목
2. 실험 목적
3. 실험 원리(이론)
4. 실험 재료, 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고문헌
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DNA 띠를 관찰할 수 있다는 이유로 후자를 선호하는 실험자들도 있다. 이 때 탈색 과정은 보통 필요치 않으나, 10 ng 이하의 적은 양의 DNA를 검출할 때에는 결합하지 않고, ethidium bromide가 gel에 묻어 있으면 바탕이 흐려 보이므로 증류수나 1mM MgSO4
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. 정제 과정에서 발생할 수 있는 다양한 변수들에 대해 지속적인 연구와 최적화가 필요함을 시사한다. 이와 같은 실험 결과들은 앞으로의 비닐 단량체 생산 공정에 중요한 기초 자료로 활용될 수 있을 것이다.
5. 결과에 대한 논의
개시제와 비
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plasmid DNA는 튜브의 옆 면에 구멍을 뚫어서 주사기로 추출할 수 있다. EtBr은 buthanol로 추출할 수 있고 이렇게 얻은 plasmid DNA는 거의 100% 순수하다. E.coli의 DNA 추출방법
① 전자동 핵산 추출정제 장치 이용
② 크기에 기초한 분리
③ 구조에
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Plasmid DNA를 13000RPM으로 1분간 돌린다.
Ⅳ. Result
추출한 Plasmid DNA 의 모습
Ⅴ. Discussion
개인적으로는 2번째 해보는 DNA 추출이었다. 버퍼용액 키트를 만드는 회사마다 다
다르므로 새로웠지만, sample에서 DNA를 추출하는 원리는 같으므로 실험에 잘
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DNA를 증폭시킬 수 있는 것이다.
5. 실험 재료와 방법
① 실험 재료
Agarose gel, EtBr, TAE buffer, loading buffer, tray, micropipet & tips, tubes, marker
② 실험 방법
PCR로 얻어낸 sample을 agarose gel에 loading 하여 electrophoresis 한다.
6. 실험 결과
Electrophoresis의 결과로
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실험 과정 중) 8번
튜브(위층): 에탄올, DNA / 회수관(아래층): 물, Proteinase K, 혈액
9번
튜브(위층): 에탄올, DNA / 회수관(아래층): washing buffer 1 (WA1), 히스톤 단백질, 세포막
10번
튜브(위층): 에탄올, DNA / 회수관(아래층): washing buffer 2 (WA2), 히스톤 단
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