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PCR의 원리 및 순서
중합효소 연쇄 반응(Polymerase chain reaction)
PCR법에 의해 세포·조직에서 아주 미량의 DNA를 추출해 특정영역 DNA를 증폭해 유전자 진단 등에 이용하는 것이 가능하다.
주형이 되는 double strand DNA의 표적 부분의 양끝 염기
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polymerase chain reaction, RT-PCR)과 형광물질을 사용하여 DNA를 증폭시키면서 증폭산물을 동시에 검출하는 실시간 중합효소 연쇄 반응 등이 있다.
PCR 증폭효율에 영향요인
① 각 단계의 반응온도와 시간
② cycle 수
③ 반응액 조성(주형 DNA, dNTP 농
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영양 생화학 실험
1. 주제 RT(Reverse Transcription)-PCR , PCR (polymerase chain reaction)
2.
재료
및
기구 기구 PCR, mini centri, PCR tube, e.p tube, incubator, micro pipette, glove, ice box.
시약 1) RT-PCR
DEPC, RNA sample, oligo dT, RT buffer, dNTP, RT enzyme., Thermal Cycler
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교했을 때, 생물검정법에서 양성 반응을 보이는 시료는 RT-PCR-ELISA법에서도 모두 양성 반응을 보이고 몇몇 생물검정법에서 음성반응을 보였던 시료에서도 양성반응을 보였다. ※ PCR (Polymerase Chain Reaction)
※ 효소 항체 결합법(ELISA)
※ RT
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DNA를 합성.
1-3.PCR의 이용
PCR의 이용
밝혀진 유전자의 검출
임상검사-암세포 유무의 진단
감염증-병원체 존재의 진단
태아의 성별 진단
법의학-개인의 특징 확인 1. PCR
2. RT-PCR
3. Real time-PCR
4. PCR의 응용
5. Western blot
6. 출처
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Rt.
size/reaction
3+
3+
3+
3+
2+
2+
2+
2+
2+
Pupil Lt.
size/reaction
3+
3+
3+
3+
2+
2+
3+
3+
3+
Motor Arms Rt/Lt
3-4-3-3
Motor Legs Rt/Lt
●협진의뢰
20150317
NS ID(감염내과)
의뢰사유
환자 urine에서 평소와 다른 냄새가 난다고 보호자 말씀하시며 지금까지 U/A상 특이소견 없었
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Reaction 증가에 따른 Filler-Polymer Interaction양 증가가 Polymer 움직임 제한을 유발해 그에 따른 효과로 추정됨. HD와 M10의 감소 경향의 경우 반응온도 유지를 위한 Rotor의 RPM증가로 인한 Filler 분산 증가의 영향으로 보임.
3) 결과
반응 온도와 분산 시
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