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DNA를 분리해내는 실험으로 실험을 통해 각각의 buffer가 사용되는 이유를 알 수 있었고 전기영동 장치로 얻어진 DNA를 확인할 수 있었다.
4. 참고문헌
(1) http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_ligase
(2)http://blog.naver.com/withcoffee67?Redirect=Log&logNo=70160635571
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sphodiester결합을 촉진키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유결합적으로 연결한다.
(3) 실험 원리
① Ligation : DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용 하는 l
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비행경로에 따라 주형의 상보적인 핵산이 합성되어 새로운 DNA 한 가닥 사슬이 신장되는 것이다.
RNA 프라이머는 RNA 프라이머제(primerase)라고 하는 효소에 의해 합성된다. RNA 프라이머제는 헬리카제에 의해 풀어진 DNA 한 가닥 사슬 중에 10 뉴클
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, http://blog.naver.com/mungsun2080?Redirect=Log&logNo=60013031358
http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_ligase , http://en.wikipedia.org/wiki/Restriction_enzyme
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이 있는데, 현재 많이 사용되는 ligase는 T4 DNA ligase와 E. coli DNA ligase이다. T4 DNA ligase는 cofactor로 ATP를 필요로 하고, E. coli ligase는 NAD+를 필요로 한다. 이들 두 ligase는 blunt-ended DNA, cohesive-ended DNA, nicked DNA등에 모두 작용할 수 있으나 E. coli DNA ligase
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DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되었는지 확인하기 위해서는 cloning 까지 마쳐야 한다. cloning이 금방 끝나는 것이 아니라 오래 걸린다. 또, 제대로 colony가 뜨지
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