[만점레포트] T cell migration 실험 과정 및 분석 방법

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목차

Ⅰ. Objective
Ⅱ. Assay Principle
1) Jurkat cell line
2) Chemokines
-chemokine의 종류:
기준①: housekeeping chemokine과 inflammatory chemokine
기준②: CXC, CC, C, CX3C의 subgroups
-chemokine receptor
-chemokine의 signaling
-chemokine의 기능
3)human SDF1α(stromal cell-derived factor1-alpha)
-stromal cell-derived factor1(SDF1)
-SDF1α의 기능
-SDF1α의 receptor
4)T cell migration
5) T migration assay의 principle(원리)

Ⅲ. Materials

Ⅳ. Assay protocol
1) CO2 incubator에서 자라고 있는 jurkat T cell을 harvest
2) cell counting과 분주
3) lower well로 이동한 cell을 harvest한다.
4) cell counting

Ⅴ. Results & Observation
1) Results
2) Jurkat cell line과 SDF-1a
3) in vivo situation를 바탕으로 한 observation

본문내용

Ⅰ. Objective
Cell migration assay의 다양한 기법 중 transwell migration assay(Boyden chamber assay)를 사용하여, 서로 다른 농도의chemokine에 의해 유도된, T lymphocyte의 migration을 양적으로 분석(quantitative analysis)하고자 한다. 이때의 chemokine으로는 human SDF1α가, T lymphocyte로는 Jurkat cell line이 사용되었다. chemokine (SDF1α)의 농도를 아래와 같은 3가지 조건으로 달리하여 실험을 진행하였다. 실험의 정확도를 높이기 위해 각각을 triplicate하여, 한 조건당 3 well에 동일한 실험을 진행하였다.
※condition: 총 3가지의 조건이 존재하며, 한 조건당 triplicate로 구성한다.
조건①: lower chamber에 serum만 들어간 control
조건②: serum과 SDF1 50ng/ml
조건③: serum과 SDF1 100ng/ml
이러한 실험을 통해, chemokine(SDF1α)의 기능, Jurkat T cell의 특성, cell migration assay 기법과 그 protocol을 이해하고, 궁극적으로는 in vivo situation에서의 chemokine을 통한 T cell migration 과정을 간접적으로 이해하고자 한다.

키워드

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