미생물염색법

소개글

미생물염색법에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Introduction
▶ 염색
▶ 세균 염색법과 색소
▶ 단염색(Simple staining)
▶ 생체염색(Vital staining)
▶ 감별염색법(differential staining)
- 그람염색법(Gram's staining)
- 항산성 염색(Ziehl, 1884)
▶ 특수염색법
- 아포염색
- 편모염색
- 협막염색
- 이염소체염색
- 핵염색

2. Material & Methods
- 그람 염색법(gram staining)

3. References

본문내용

체가 형성되는데 것은 CV-I 복합체보다 더욱 강하게 결합되어 제거하기가 더욱 어렵다.
다. 탈색제(Decolrizing agent) : 95%의 ethanol 사용. 그람 음성균은 세포벽중의 지방함량 이 높아서 지방이 알코올에 의해 녹아 세포벽에 큰 구멍이 생기고 세포벽 단백질의 탈수 가 어느 정도 진행된다. 따라서 CV-I 복합체가 수비게 세포벽에서 떨어져 나오면서 세 포벽은 무색이 된다. 그람 양성균은 세포벽의 지방 함유량이 낮아 알코올에 의해 쉽게 용해, 제거되어 작은 (미세한) 구멍이 생기나 이것은 댄백질의 탈수작용(변성)으로 닫혀 진다. 그래서 Mg-RNA-CV-I복합체는 제거되지 않고 남아서 여전히 보라색을 띤다.
라. 대비염색(Counter stain): Safranin 이미 탈생된 그람 음성세포에 대해서만 염색이 된 다.(분홍색)
- 실험재료
① Culture (24 hr cultures) : Gram(+) - Bacillus subtilis, Gram(-) - E.coli
② 시약 : crystal violet, Gram;s iodine, 95% ethanol, sfranin
③ 기구 : 현미경, lens tissue, spoid, 배금이, alcohol lamp tissue(실험용), slide glass, 증류수기
- 실험방법
① 슬라이드 세척
② 균체도말
③ Air drying, heat fixation
④ Crystal violet(1분간 염색), 세척
⑤ Gram’s iodine(1분간 고정), 세척
⑥ 95% ethanolㄹ 탈색시킴(알코올 방울방울 떨어뜨려 지나친 탈색을 방지), 세척
⑦ Safranin으로 염색(10~30초간), 세척 후 건조시켜 검경한다.
- 실험시 유의사항
① 그람 염색은 정확한 조작을 하여야 정확한 결과를 얻을 수 있다.
② 과도한 탈색을 하면 1차 염색약이 탈색되어 그람 양성균이 그람 음성균으로 판명 오류 발생
③ 각 조작 사이 사이에 반드시 물로 세척을 잘 하여 다음 시약의 작용이 정확하도록 함.
④ 24시간이 넘지 않은 신선한 배양균주를 사용할 것(특히 그람 양성균은 배양 시간이 경 과함에 따라 1차 염색약의 착색능이 줄어들어 Gram variable이 되기도 한다.
3. References
- 박석기외, 최신미생물학, 신광문화사, 1995, pp. 69~72
- 미생물학 실험교재 편찬위원회, 미생물학 실험, 월드사이언스, 1995, p.74

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