미생물의 순수분리, 획선평판법

목차

(1) 실험제목(Title)

(2) 서론(Introduction)

(3) 재료 및 방법(Material and Methods)

(4) 결과 및 고찰(Results and Discussion)

본문내용

배양하는 작업을 반복하면 미생물을 순수분리(isolation)할 수 있게 된다.
주입평판법(pour plate method) : 세균과 진균류의 순수배양에 널리 쓰인다. 원래의 시료를 여러 번 희석해서 배양접시에 부었을 때 미생물이 각각 분리된 집락을 형성할 수
획선평판법(streak method) : 여러 미생물이 섞여 있는 혼합물을 백금이나 면봉을 이용해 한천배지의 한쪽 끝에 접종한 다음 여러 형태를 그리면서 표면 전체로 획선을 긋는다. 이 과정 중에 어떤 지점에 이르면 백금에서 단일세포가 떨어져 나와 한천 표면에 묻게 되고 이것이 자라 분리된 집락을 형성한다. 단일세포가 공간적으로 얼마나 떨어져서 자라는가에 따라 순수배양의 성공여부가 결정된다.
(3) 재료 및 방법(Material and Methods)
재료
broth culture (액체배양액)
→ agar slant , agar plate
미생물(Bacillus magaterium)
petri dish , 시험관
백금이
알코올램프
방법
㉠ petri dish에 헷갈리지 않도록 각자의 이름을 적고, 준비해둔 broth culture를 반보다 조금 적게 부어 하얗게 굳을 때까지 둔다.
㉡ broth culture가 하얗게 굳으면 준비한 미생물(Bacillus megaterium)을 살균한 백금이에 묻힌다(살균할 때는 빨갛게 달궈질정도로 가열해 멸균해준다.)
※ 미생물은 Salmonella typhimurium, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium을 사용했는데, 우리 조는 Bacillus megaterium을 사용했다.
㉢ 균이 묻은 백금이를 평판배지 위에 선 모양으로 그으면서 여러 곳을 접종한다. 이 때 그은 획과 다른방향으로 획을 그으면서 미생물을 퍼트린다.
㉣ 시험관으로의 이식조작법을 시행한다. 왼손으로 시험관을 감싸고 백금이를 화염멸균한 후 미생물을 묻히고 지그재그로 접종한다.
※ 가급적이면 뚜껑은 내려놓지 않도록 한다. 실험대에 올려놓으면 오염가능성이 높기 때문이다.
㉤
뚜껑과 마개를 화염멸균한 후 다시 닫는다. 모두 항온기에 넣 어준다.
(4) 결과 및 고찰(Results and Discussion)
획선평판법의 결과
획선평판법 - 최지연
획선평판법 - 최성아
획선평판법 - 박시현
획선평판법 - 진우정
획선평판법 - 최슬기
획선평판법 - 장예랑
→ 결과 : plate의 아랫방향에서 시작하여 방향을 바꾸어가며 4번에 걸쳐 균을 퍼뜨렸다. 처음 균을 옮긴 부분에서는 배양된 균들이 뭉쳐있어서 colony를 분간하기 어렵지만, 마지막부분으로 갈수록 균이 넓게 퍼져 colony가 형성된 것을 관찰할 수 있다.
시험관으로의 획선평판법
→ 고찰 : 균의 colony를 정확히 볼 수 없었다. 그 이유는 실험 도중 잡균이 많이 들어갔거나, 너무 오래 배양시켰기 때문이다. 다른 조의 결과와 비교해보며 획선평판법의 방법을 잘 익힐 수 있었다.
(5) 참고문헌
박영현 “식품미생물학 및 실험”, p11~26, 보문각, 2005

키워드

미생물,   순수,   분리,   평판,   배지