세포염색(gram strain.)

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세포염색(gram strain.)에 대한 보고서 자료입니다.

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니슬염색(Nissl Stain)
염기성아닐린염료(basic aniline dye; 타이오닌 thionine, 메틸렌 블루 methylene blue, 톨루이딘 블루 toluidine blue, 크레실 바이올렛 cresyl violet 등)로 신경조직을 염색하는 방법으로 신경조직을 염색하는 가장 기본적인 방법이다. 니슬염색에서는 H-E 염색에서 관찰되는 모든 구조 외에 신경세포체의 니슬소체가 뚜렷하게 관찰된다. 신경원의 형태와 배열에 의해 신경핵과 피질의 각 부분을 분류하는 세포구축학적 연구(cytoarchitectonic study)는 니슬염색을 기본으로 한다.
- 수초염색(Myelin Stain)
유수신경섬유의 수초를 염색하는 방법으로 니슬염색과 함께 신경조직을 염색하는 가장 기본적인 방법의 하나이다. 중크롬산칼륨(potassium dichromate)으로 매염(mordanting)18)한 후 헤마톡실린(hematoxylin)으로 염색하거나(바이게르트13)방법 Weigert method), 사산화오스뮴(오스뮴산 OsO4, osmium tetroxide, osmic acid)이나 룩솔 패스트 블루(luxol fast blue)와 같은 지방질을 염색하는 염료로 염색할 수 있다. 중추신경계의 회색질을 주로 염색하는 니슬염색과 대조적으로 백색질(white matter)을 주로 염색한다. 수초염색으로 신경핵이나 피질을 분류하는 방법은 수초구축학적 연구(myeloarchitectonic study)라고 한다.
지금은 거의 사용되지 않는 고전적인 방법이지만 발생과정에서 수초염색을 하여 신경섬유다발(신경로)을 구분하는 플레시히방법(Fleschig method)이나, 퇴행성변화를 보이는 신경섬유의 수초를 염색하여 그 종말부분을 추적하는 마르키방법(Marchi method)은 모두 수초염색을 특수하게 적용한 신경로 추적방법이다.
- 환원은염색(Reduced Silver Method)
신경조직을 은(silver)으로 일차처리한 후 하이드로퀴논(hydroquinon)이나 포르말린(formalin) 등의 환원제(reducing agent)로 조직의 은을 환원시키면 신경원의 세포질에는 미세한 섬유성 구조인 신경원섬유(neurofibril)가 관찰된다. 신경원섬유는 광학현미경의 분해한계 이하인 직경 10 nm 정도의 신경미세섬유(neurofilament)가 서로 붙어 미세섬유의 다발을 이루고 여기에 은이 붙어 광학현미경에서 나타날 정도의 섬유형태로 나타나는 구조라고 추측된다. 신경원섬유는 신경세포의 세포체와 축삭, 수상돌기에서 모두 나타날 수 있으며, 신경미세섬유의 농도가 가장 높은 축삭이 가장 진하게 염색된다. 비일쇼프스키방법(Bielschowsky method), 노니데즈방법(Nonidez method), 보디안방법(Bodian method) 등 여러가지 변형된 방법이 있다. 절단된 축삭의 신경종말을 추적하는 나우타방법(Nauta method)은 환원은염색을 변성되는 축삭에 적용한 것이다.
- 골지방법(Golgi Method, 골지금속도금방법 Golgi's Metallic Impregnation Method)
신경조직을 중크롬산칼륨(potassium dichromate)이나 크롬아연(zinc chromate) 등 크롬을 함유한 고정액(fixative)으로 전처치한 후 은(silver nitrate)이나 수은(mercury chloride)19)과 같은 중금속으로 염색하는 방법으로 수많은 변형된 방법이 있다. 보통의 염색방법으로는 신경조직 구성요소의 일부분만이 나타나지만 골지방법으로 염색하면 신경원 또는 신경아교세포 전체가 나타난다. 또한
모든 세포가 다 염색되어 나타나는 것은 아니며, 보통의 경우 전체 신경원의 1% 정도만이 염색된다. 그 대신 염색된 신경세포는 세포체와 돌기가 모두 나타난다. 염색이 잘 된 경우에는 세포체와 수상돌기, 축삭과 그 가지들이 모두 미세한 부분까지 잘 관찰된다.
골지(Gogi)의 금속도금(metallic impregnation) 방법은 보통의 염색과 같이 세포의 한 요소와 결합되어 색이 나타나는 것이 아니라 은(silver nitrate)이나 수은(mercury chloride)과 같은 중금속으로 세포의 표면을 도금하는 것과 같이 둘러 싸는 것이다. 그러므로 이러한 방법은 영어로는 염색(stain)이라고 하지 않고 'impregnation'이라 하며 일본에서는 은으로 세포에 도금을 한다는 뜻의 '도은법(鍍銀法)'이라는 용어를 사용한다. 세포체는 은이나 수은과 같은 중금속에 싸여 있으므로 세포체의 핵과 소기관은 거의 관찰할 수 없다. 가끔 신경아교세포가 염색되기도 하며, 대부분 혈관의 일부가 염색된다. 니슬염색보다도 오래전에 골지에 의해 발견되었으며 가장 위대한 신경조직학자로 불리우는 라몬 이 카할(Ramon y Cajal)은 일생동안 이 염색법을 사용하여 연구하였다. 아직까지도 골지염색만으로 연구하여 논문을 발표하는 경우도 있다.
- 신경아교세포 염색방법 (Neuroglial Staining)
신경아교세포의 돌기와 세포체가 모두 나오도록 염색하는 방법에는 카할(Cajal, 라몬 이 카할20), Ramon y Cajal)의 금승홍법(gold-sublimate method)과 리오 오르테가21)(del Rio Hortega)의 탄산은방법(silver carbonate)이 있다. 카할의 금승홍법은 포르말린(formalin)과 브롬화암모니움(ammonium bromide) 혼합액(FAB solution)으로 고정한 후 금(gold chloride)과 승홍(mercury chloride, 염화제2수은 HgCl2)을 함유한 용액으로 염색하는 방법으로 별아교세포(astrocyte)가 선택적으로 염색된다. 리오 오르테가의 탄산은방법은 포르말린-브롬화암모니움 혼합액(FAB solution)으로 고정한 후 탄산은(silver carbonate)으로 염색하는 방법으로 방법의 변형에 따라서 별아교세포, 희소돌기아교세포(oligodendrocyte), 미세아교세포(microglia)가 염색된다. 희소돌기아교세포와 미세아교세포를 염색하는 방법으로 많이 쓰인다.

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세포염색,   세포,   DNA,   RNA,   염색