생물 화학 공학

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눈금 측정이 아주 조심히 이루어져야 한다. 이것은 신중히 양을 측정함으로써 이룰 수 있다. 총 Column 부피 Vt 는 젤이 차지한 부피 Vg와 용매 분자의 void volume Vo을 합한 값과 같다. 단백질의 분자량은 이와 관련된 몇 몇 표준 분자들의 추출 부피 (Elution volume Ve = Vo/Vg)를 통해 결정된다. 여기서 Ve는 용질을 Column에서 추출하기 위한 용매의 부피이다.
널리 사용되는 여러종류의 전기영동방법들은 분자량을 측정하는데 있어, 강한 음전하를 띤 계면활성제 Sodium Dodecyl Sulfate(SDS)를 사용한다. SDS polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)에서 계면활성제는 단백질의 소수성 부위에 결합한다.
SDS 분자의 결합결과, 단백질은 변성되며, 막대 모양이 된다. ( 이 효과는 Disulfide를 깨는 mercaptoehanol을 가함으로써도 나타난다) 대부분의 분자들이 분자량과 거의 비례적으로 SDS분자와 결합하기 때문에, 전기영동시, SDS-결합 단백질들은 양극(anode, + pole)쪽으로 젤효과에 의해 그들의 분자량에 따라서 이동한다.
분자량의 추정은 초원심분리(Ultracentrifugartion)을 통해서도 이루어 질 수 있다. 원심분리는 화합물을 크기와, 표면적과, 밀도에 따라 분리하는 것이다. 강한 원심력을 사용 함 으로써, 단백질 같은 거대분자들의 분자질량을 결정할 수 있다.
분석적인 원심분리를 사용함으로써, 원심분리기의 영향으로 인해 그와 같이 미세한 것 앙금이 시각적으로 측정된다.

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생물,   화학,   생명 공학,   생화학