목차
1. 대장균군 이란?
2. 대장균군수란
(1) 정성시험
① 유당부이온법
② BGLB 배지법
③ 데스옥시콜레이트 유당한천 배지법
(2) 정량시험
① 최확수법
② BGLB 배지에 의한 정량법
③ 데스옥시콜레이트유당한천배지에 의한 정량법
2. 대장균군수란
(1) 정성시험
① 유당부이온법
② BGLB 배지법
③ 데스옥시콜레이트 유당한천 배지법
(2) 정량시험
① 최확수법
② BGLB 배지에 의한 정량법
③ 데스옥시콜레이트유당한천배지에 의한 정량법
본문내용
정, 확정, 완전시험을 행하고 대장균군의 유무를 확인한 다음 최확수표로부터 검체 100㎖중의 최확수를 구한다. 예로서 대장균군의 최확수법에 의한 정량시험에 의하여 검체 또는 희석검체의 각각의 발효관을 5개씩 사용하여 다음과 같은 결과를 얻었다면
검체접종량 10㎖ 1㎖ 0.1㎖
가스양성관수 5개 3개 1개
최확수표에 의한 검체 10㎖중의 MPN은 110으로 된다.
이 때 검체접종량이 1, 0.1, 0.01㎖일 때에는 110 10 = 1,100으로 한다.
검체의 접종이 3단계 이상으로 행하여졌을 때에는 다음 표와 같이 취급한다. 이 때의 숫자는 양성관수, 내의 숫자는 유효숫자이다.
예 Ⅰ,Ⅱ : 5개 양성을 표시한 최소 접종량으로부터 시작한다.
예 Ⅲ : 양성을 인정한 접종량을 중간으로 한다.
예 Ⅳ : 최소유효 접종량(이 경우는 0.01㎖)보다 1단계 적은 접종량(0.001㎖)일 때에는 양성관을 인정할 경우 최초 접종량에 의한 양성관수(이 경우 1)를 상단위에 가한다. 즉, 접종량 0.01㎖양성관수 1에 접종량 0.001㎖의 양성관수를 가하여 2로 한다.
[최확수표]
별표 1에 의하여 또 3개씩 접종했을 때에는 위 5개 법에 준하여 별표 2에 따라 최확수를 구한다.
② BGLB 배지에 의한 정량법
시험용액 10, 1 또는 0.1㎖를 5개씩의 BGLB 배지에 접종한다. 0.I㎖이하를 접종할 필요가 있을 때에는 10배 희석단계액을 각각 1㎖씩 사용한다. 이 때에 시험용액의 최대량을 가한 배지의 전부 또는 대부분에서 가스발생을 인정하고 최소량을 가한 배지의 전부 또는 대부분이 가스를 발생하지 않도록 접종량과 희석도를 고려하여야 한다. 이하의 조작은 각 발효관에 대하여 BGLB 배지에 의한 정성시험법에 따라 하고 대장균군의 유무를 조사하여 최확수표에 따라 검체 100㎖ 또는 100g중의 대장균군수를 산출한다.
③ 데스옥시콜레이트유당한천배지에 의한 정량법
1) 일반사항 (1) 검체의 채취 및 취급 ②의 시험용액 1㎖와 각단계 희석액 1㎖에 대하여 이
예 접종량
1㎖
0.1㎖
0.01㎖
0.001㎖
Ⅰ
5
⑤
(5
⑤
⑤
④
①
3
③
②
③
1
②
0
0
1)
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
배지에 의한 정성시험법과 같은 조작으로 35 1 에서 20 2시간 배양한 후 생성된 집락 중 전형적인 집락 또는 의심스러운 집락에 대하여 정성시험 때와 같은 조작으로 대장균군의 유무를 결정한다. 균수 산출은 세균수(일반세균수)측정법에 따라한다.
검체접종량 10㎖ 1㎖ 0.1㎖
가스양성관수 5개 3개 1개
최확수표에 의한 검체 10㎖중의 MPN은 110으로 된다.
이 때 검체접종량이 1, 0.1, 0.01㎖일 때에는 110 10 = 1,100으로 한다.
검체의 접종이 3단계 이상으로 행하여졌을 때에는 다음 표와 같이 취급한다. 이 때의 숫자는 양성관수, 내의 숫자는 유효숫자이다.
예 Ⅰ,Ⅱ : 5개 양성을 표시한 최소 접종량으로부터 시작한다.
예 Ⅲ : 양성을 인정한 접종량을 중간으로 한다.
예 Ⅳ : 최소유효 접종량(이 경우는 0.01㎖)보다 1단계 적은 접종량(0.001㎖)일 때에는 양성관을 인정할 경우 최초 접종량에 의한 양성관수(이 경우 1)를 상단위에 가한다. 즉, 접종량 0.01㎖양성관수 1에 접종량 0.001㎖의 양성관수를 가하여 2로 한다.
[최확수표]
별표 1에 의하여 또 3개씩 접종했을 때에는 위 5개 법에 준하여 별표 2에 따라 최확수를 구한다.
② BGLB 배지에 의한 정량법
시험용액 10, 1 또는 0.1㎖를 5개씩의 BGLB 배지에 접종한다. 0.I㎖이하를 접종할 필요가 있을 때에는 10배 희석단계액을 각각 1㎖씩 사용한다. 이 때에 시험용액의 최대량을 가한 배지의 전부 또는 대부분에서 가스발생을 인정하고 최소량을 가한 배지의 전부 또는 대부분이 가스를 발생하지 않도록 접종량과 희석도를 고려하여야 한다. 이하의 조작은 각 발효관에 대하여 BGLB 배지에 의한 정성시험법에 따라 하고 대장균군의 유무를 조사하여 최확수표에 따라 검체 100㎖ 또는 100g중의 대장균군수를 산출한다.
③ 데스옥시콜레이트유당한천배지에 의한 정량법
1) 일반사항 (1) 검체의 채취 및 취급 ②의 시험용액 1㎖와 각단계 희석액 1㎖에 대하여 이
예 접종량
1㎖
0.1㎖
0.01㎖
0.001㎖
Ⅰ
5
⑤
(5
⑤
⑤
④
①
3
③
②
③
1
②
0
0
1)
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
배지에 의한 정성시험법과 같은 조작으로 35 1 에서 20 2시간 배양한 후 생성된 집락 중 전형적인 집락 또는 의심스러운 집락에 대하여 정성시험 때와 같은 조작으로 대장균군의 유무를 결정한다. 균수 산출은 세균수(일반세균수)측정법에 따라한다.