키토산올리고당

목차

part 1. 키토산 올리고당
<키틴과 키토산의 구조>
<키틴과 키토산의 응용분야>
<키토산 올리고당을 제조하는 방법>
<UF membrane reactor system>
<키토산 올리고당을 사용하여 항암, 항균, 항산화등의 생리활성을 살펴보기 >
<항균효과>
<키토산 올리고당의 항산화 활성>
<ESR spectroscopy>
<키토산 올리고당의 알츠하이머 병>

part 2. 칼슘과 인공뼈의 개발
<칼슘의 분포도>
<어류로부터 칼슘을 제조하는 방법>-23
<칼슘 제조 방법>-24
<어류의 뼈와 사람의 뼈 비교>-30
<하이드록시 아파타이트와 인공 뼈를 비교함>-31
<인공뼈의 안정성>-32
<수산 가공물로부터 기능성 펩타이드의 생산과정>
<수산 가공 부산물로부터 항산화 효과물질을 찾는 단계>-40
<이렇게 만들어진 라디컬들은 다양한 작용을 하게 되는데 예를 들어보자>-42
<라디컬이나 반응산소종에 의해서 발생되어지는 병>-43

본문내용

로 구성되어져 있었다.
- 그 활성도는 IC50 (50%를 저해하는 농도)가 ① 2.65 ② 17.13 으로 아주 높은 활성을 나타낸다는 것을 알 수 있었다.
- 이와 같이 수산가공부산물인 어피로부터 생리활성물질인 항고혈압 물질을 개발할 수 있었다.
<이렇게 개발된 항 고혈압 물질을 기존에 시판되고 있는 Captoprill이라는 물질과 in vivo에서 어떠한 효과를 나타내는지의 실험>-39
- 결과: Control보다는 일반적으로 높은 효과(낮은 혈압)를 나타내었지만 시판되고 있는 캡토프릴보다는 낮은 효과(높은 혈압)을 보였다.
- 아미노산 배열을 바꿔가면서 측정하게 되면, 좀 더 높은 활성을 내는 물질을 개발할 것으로 예측!!
<수산 가공 부산물로부터 항산화 효과물질을 찾는 단계>-40
- 일반적으로 지질이 과산화가 일어나는데 우리 세포막에 있는 지질이 가장 과산화가 잘 되는 것으로 알려짐
- 우리는 생명을 유지하기 위해 필연적으로 산소를 섭취함- 결국 TCA사이클과 전자전달계를 거치면서 라디컬을 발생을 하게 되는데, 그 때 발생된 라디컬은 이러한 단백질이나 지질, 당, 핵산같은 물질들을 공격해서 여러 가지 좋지 못한 작용을 하는 것으로 알려져 있음
<라디컬이 어떻게 발생되는가?>-41
- 라디컬은 일반적으로 3가지 단계로 일어나게 된다.
① 개시단계-주로 지질에서 가장 많이 반응이 일어나게 됨
- 지질(기질)에 라디컬이 만들어지게 되고 이런 라디컬들은 계속해서 산소와 반응을 함으로써 이와같은 반응산소종을 만들거나, 그렇지 않으면 다른 라디컬을 만들게 되고
② 연쇄반응 - 이런식으로 계속해서 연쇄반응이 일어나다가
③ 종결반응 - 결국, 마지막 단계에서 라디컬과 라디컬이 반응을 해서 종결반응의 polymer를 만들게 됨
<이렇게 만들어진 라디컬들은 다양한 작용을 하게 되는데 예를 들어보자>-42
- 이러한 반응산소종들과 라디컬들은 지질, 단백질, DNA과 RNA를 공격을 함으로써, 노화와 병을 유발하게 된다.
- 그렇지만 우리몸에는 이러한 라디컬이나 반응산소종을 소거시킬 수 있는 시스템을 가지고 있다.
① 항산화효소 시스템: 항산화효소라고 하면 일반적으로 SOD를 말하고, 이에 의해서 라디컬들이 소거되게 된다.
② 비타민 종류(C, E), Selenium과 같은 식이 항산화제에 의해서도 일부 소거되는 것으로 알려져 있다.
- 결국: 우리몸은 라디컬의 항상성을 유지하게 되고, 우리 몸을 지탱해나가는 원동력이 됨!
<라디컬이나 반응산소종에 의해서 발생되어지는 병>-43
- 대표적으로 AIDS, 암, 당뇨병, 쇼크, 염증
- 따라서 현재의 연구들은 항암, 순환기계 같은 실험들을 하면서, 항산화활성을 병행하면서 실험을 하는 것이 현재의 추세
<항산화활성을 측정하는 방법>-슬라이드 없음,45
- 앞서 키토산 파트에서 일부 말씀드린 바와 같이 항산화 활성을 측정하는 방법은 ①라디컬을 소거시키는 활성을 측정하는 방법이 있고, ②지질 과산화물의 양을 측정하는 방법이 있다.
- 지질 과산화물을 측정하는 가장 대표적인 것이 TBA분석법이다.
- TBA분석법의 절차
① 샘플을 녹이고 그 샘플에 리놀렌산을 사용해 지질 과산화물을 만들어준다.
- 리놀렌산 에탄올 에멀젼을 만들게 되는데 이를 만드는 방법은 리놀렌산+에탄올+증류수를 첨가, 이것을 지질 과산화를 시킬 때는 40도정도에서 반응이 일어나도록 함
② 이와 같이 지질 과산화물을 만든 용액에, 항산화물질을 첨가하면, 어느 정도 지질 과산화가 막아졌는지 확인할 수 있다.
측정 방법: 지질 과산화물을 40도에서 1일차, 2일차~7일차까지 매일 같은 시간대에 측정 하게 됨
: 이미 만든 리놀렌산 에탄올 에멀젼을 취하고, 여기에 4ml이 되도록 TBA시약 과 20%아세틸산 시약을 넣고, 8.1%sodium dodecyl sulfate용액을 넣어서 총 4ml이 되도록 해준다.
: 한시간동안 5도에서 인큐베이션
: 그 후 한시간동안 끓이면 붉은색으로 발색이 일어난다.
: 그 발색의 정도를 흡광도 532nm에서 측정을 함으로써 지질 과산화물을 어느 정도 막았는지를 알 수 있다.
<어피 젤라틴 가수분해 물로부터 TBA값를 측정함으로써, 순수하게 분리/정제하여 얻은 펩티드의 1차 아미노산 서열 분석>-46
- 항 고혈압 활성에서도 말한 것과 같이 동일한 방법으로 이온교환크로마토그래피, 겔 크로마토그래피방법을 이용하여 순수한 하나의 티클을 구할 수 있고, 이를 에드만 분해법에 의해 일차 아미노산 서열 분석을 한 결과, 이와 같은 두개의 시퀀스를 얻을 수 있었다.
<이렇게 분리 정제한 항산화 펩티드와 시판되고 있는 천연 항산화제의 토코페롤을 이용해서 세포 수준에서 항산화효과를 비교분석한 결과>-47
- 이때 사용한 세포는 Ac2F 세포이며, 이 세포에 지질 과산화(세포손상)를 인위적으로 유발시킴
- 이 후 분리정제한 펩티드와 토코페롤을 처리를 하게 되면 어느 정도 세포가 생존되는지를 알 수 있다.
- 분리정제한 펩티드가 토코페롤과 거의 유사한 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다.
- 따라서 어피 젤라틴 가수분해물이 이러한 항산화효과가 뛰어나기에 항산화제로의 개발가능성을 나타낸다.
<마지막:항혈액응고물질>-48
- 혈관에 혈전이 생성되면 왼쪽에 있는 그림과 같은 형태를 띄게 됨(이와 같이 혈전이 혈관 내에 생성되면 뇌졸중, 심근경색과 같은 병을 유발)
- 따라서 혈관 내에 혈전생성을 억제하는 것은 심근경색과 뇌졸중등의 순환계통 병을 막을 수 있기에 많은 연구가 진행되고 있음
- 오른쪽의 그림: 어류 단백질을 가수분해 시킨 이후, 항 혈액 응고펩티드를 분리정제 하여 컨트롤과 비교해서 어느 정도의 혈액을 지연시키는지 실험 한 데이터이다.
- 컨트롤과 비교해서 최대 20mg/ml에서 약 300초 이상을 지연시키는 효과가 있기에 어류단백질로부터 얻은 펩티드가 항 혈액 응고 활성을 가지고 있다는 것을 단적으로 나타냄
<2002년도 미국의 건강보존식품 판매순서>
- 복합 비타민류, 칼슘, 글루코사민, 비타민 ECD, 철....8위가 Fish oil, 9위가 항산화제..
- 해마다 증가율을 조사한 결과, 8위의 Fish oil이 증가율 58%로 가장 높은 성장률

키워드

키토산올리고당,   키틴,   키토산,   항암,   ESR,   인공뼈,   어류뼈