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자와 극체가 없는 난자를 각각 10~15개 정도를 각각 다른 25μl의 수정액에 넣어주었다. 난자를 옮길 때 부유물이나 배양액이 함께 옮겨지지 않도록 주의해야 하는데 이는 부유물 등이 많을 경우 총량이 증가해 이후 농도에 영향을 줄수 있기 때문이다. 정자의 농도는 정자계산판을 사용하며 그 계산법은 <<농도 = 정자수 * 배율인자 * 희석배율>> 이다. 다음으로 whole-mount 고정과 염색을 하였다. 난자를 난구세포를 제거(hyaluronidase)하여 whole-mount 고정시키고 aceto-orcein 용액으로 염색한후 acto glycerol 용액으로 세척하여 검사한다. 염색 후 커버글라스와 슬라이드 사이를 매니큐어로 칠해서 봉합해주면 좀더 오래 보존할 수 있다. 이 후 현미경으로 관찰한다.
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