플라스미드 DNA 분리

소개글

플라스미드 DNA 분리에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

 Date
2010년 10월 7일 ~ 14일
 Subject
Plasmid DNA 분리와 젤 전기영동, 그리고 DNA 정량
Purpose & Introduce
E.coli로부터 plasmid DNA를 분리하는 방법을 익히고, 전기영동의 원리에 대해 알아보고 실험해보며, DNA정량 하는 법을 배운다.
Plasmid DNA 분리는 주로 miniprep라 부르는 방법으로 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. Plasmid 정제는 total cell DNA의 일반적인 분리방법과 같다. Plasmid를 지니는 cell을 액체배지에서 배양하여 수확하고 cell extract를 하면 된다. Extract는 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 응축시킬 수 있다. 그러나 total cell DNA 분리와 plasmid 정제와는 중요한 차이점이 있다.
Plasmid 분리는 일반적으로 많은 양의 chromosomal DNA로 부터 분리하여야 한다. 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA 만을 분리하는 것이다. 이 둘은 모두 DNA 이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. 다행히 chromosomal DNA는 분리 과정에서 limear의 형태가 되고, 크기가 상당히 크기 때문에 이러한 성질의 차이를 이용하여 분리할 수 있다.

키워드

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