목차
I. 실험목표
II. 준비물
III. 배경지식
1. Anthocyanin
2. pH-different method
3. Lambert-Beer Law
4. UV-Vis Spectrometer
1)UV-Vis spectrometer란?
2)UV-Vis spectrometer사용 방법
IV. 실험과정
1. 안토시아닌 표준 용액 만들기
2. 포도 과피에서 안토시아닌 추출
3. 실험에 필요한 buffer제작
4. pH-different method를 이용한 안토시아닌 정량
5.Beer-Lambert law를 이용한 안토시아닌 표준용액의 정량분석
IV. 실험결과
1.포도 과피 추출물
1) pH1.0
2) pH4.5
2.안토시아닌 표준용액
1) pH1.0 (buffer: 안토시아닌 표준용액= 1:1)
2)pH 4.5 (buffer: 안토시아닌 표준용액 = 1:1)
3)buffer에 희석하지 않은 것
V. 결과 분석
1. 포도 과피 추출물
1)pH-different method를 이용한 안토시아닌 정량
2)Beer-Lambert Law를 이용한 안토시아닌 정량
2.안토시아닌 표준 용액
1) 안토시아닌 표준용액을 buffer에 1:1로 희석하여 흡광도를 측정한 결과를 pH-different method를 이용하여 정량
2)희석하지 않은 표준용액을 Beer-Lambert’s Law를 이용하여 계산
VI. 결론
II. 준비물
III. 배경지식
1. Anthocyanin
2. pH-different method
3. Lambert-Beer Law
4. UV-Vis Spectrometer
1)UV-Vis spectrometer란?
2)UV-Vis spectrometer사용 방법
IV. 실험과정
1. 안토시아닌 표준 용액 만들기
2. 포도 과피에서 안토시아닌 추출
3. 실험에 필요한 buffer제작
4. pH-different method를 이용한 안토시아닌 정량
5.Beer-Lambert law를 이용한 안토시아닌 표준용액의 정량분석
IV. 실험결과
1.포도 과피 추출물
1) pH1.0
2) pH4.5
2.안토시아닌 표준용액
1) pH1.0 (buffer: 안토시아닌 표준용액= 1:1)
2)pH 4.5 (buffer: 안토시아닌 표준용액 = 1:1)
3)buffer에 희석하지 않은 것
V. 결과 분석
1. 포도 과피 추출물
1)pH-different method를 이용한 안토시아닌 정량
2)Beer-Lambert Law를 이용한 안토시아닌 정량
2.안토시아닌 표준 용액
1) 안토시아닌 표준용액을 buffer에 1:1로 희석하여 흡광도를 측정한 결과를 pH-different method를 이용하여 정량
2)희석하지 않은 표준용액을 Beer-Lambert’s Law를 이용하여 계산
VI. 결론
본문내용
실험목표, 결론, reference입니다.
I. 실험목표
1. UV-visible spectrometer의 사용법을 배운다.
2. UV-visible spectrometer를 통해 그래프를 얻고, 자료를 해석할 수 있다.
3. pH different method를 통해 안토시아닌을 정량 한다.
4. Lambert-Beer’s law과 표준 안토시아닌 용액을 이용하여 안토시아닌을 정량한다.
VI. 결론
이번 실험에서는 pH-different method와 beer-lambert law두 가지 방법을 이용하여 포도 과피 추출물과 안토시아닌 표준용액을 정량하였다. 안토시아닌 표준용액을 두 방법으로 정량한 것은 두 방법의 정확도를 알기 위한 실험이었으며, 포도 과피 추출물을 정량한 것은 포도과피 추출물과 같이 혼합물이 많이 섞여 있는 상황에서 안토시아닌의 농도 만을 측정하기 위한 실험이었다.
안토시아닌 표준 용액을 두 가지 방법으로 정량한 결과 최대 6%, 1%라는 낮은 오차율을 보였으므로 두 방법 모두 상당히 정확한 것으로 확인 할 수 있었다. 이 때 pH-different method로 구한 값이 beer-lambert law를 통해 구한 값보다 약간 컸는데 포도 과피 추출물을 측정했을 때는 오히려 pH-different method의 값이 작았다. 이는 포도 과피 추출물은 혼합물이기 때문에 안토시아닌 이외에도 빛을 흡수하는 물질들이 포함되어 있는데 pH-different method의 보정 없이 beer-lambert law 만을 사용할 경우 안토시아닌 이외의 물질이 빛을 일정 부분 흡수했더라도 안토시아닌이 빛을 흡수한 것으로 계산되기 때문에 beer-lambert law로 계산한 결과가 pH-different method를 사용한 결과보다 크게 나온 것으로 생각된다. 따라서 이 실험 결과를 통해 순 물질을 측정할 때는 beer-lambert law를 통해 충분히 높은 정확도로 물질의 농도를 구할 수 있지만 혼합물에서 특정 물질만의 농도를 구할 때는 물질에 따라 pH-different method와 같이 다른 보정방법이 필요함을 알 수 있었다.
VII. Reference
-NSF, Anthocyanin Content in Bilberry by pH-Differential Spectrophotometry
INA Method 116.000
-Isolation of Anthocyanin from Black Rice and Screening of its Antioxidant Activities
Correlation of two anthocyanin quantification methods:HPLC and spectrophotometric methods Jungmin Lee a,*, Christopher Rennaker a, Ronald E. Wrolstad b
-Principle of Modern Chemistry 6th Edition, Oxtoby, Thomson Brooks/Cole
-분광학의 이해, Pavia, 사이플러스
-Park, Young Sam et al, Isolation of Anthocyanin from Black Rice (Heukjinjubyeo) and Screening of its Antioxidant Activities, Kor. J. Microbiol. Biotechnol., Vol. 36 No. 1, 55-60, 2008
-Ronald E. Wrolstad, Characterization and Measurement of Anthocyanins by UV-Visible Spectroscopy, Current Protocols in Food Analytical Chemistry
-http://www.does.org/masterli/facsample.htm
-en.wikipedia.org/wiki/Ultraviolet-visible_spectroscopy
-en.wikipedia.org/wiki/Anthocyanin
I. 실험목표
1. UV-visible spectrometer의 사용법을 배운다.
2. UV-visible spectrometer를 통해 그래프를 얻고, 자료를 해석할 수 있다.
3. pH different method를 통해 안토시아닌을 정량 한다.
4. Lambert-Beer’s law과 표준 안토시아닌 용액을 이용하여 안토시아닌을 정량한다.
VI. 결론
이번 실험에서는 pH-different method와 beer-lambert law두 가지 방법을 이용하여 포도 과피 추출물과 안토시아닌 표준용액을 정량하였다. 안토시아닌 표준용액을 두 방법으로 정량한 것은 두 방법의 정확도를 알기 위한 실험이었으며, 포도 과피 추출물을 정량한 것은 포도과피 추출물과 같이 혼합물이 많이 섞여 있는 상황에서 안토시아닌의 농도 만을 측정하기 위한 실험이었다.
안토시아닌 표준 용액을 두 가지 방법으로 정량한 결과 최대 6%, 1%라는 낮은 오차율을 보였으므로 두 방법 모두 상당히 정확한 것으로 확인 할 수 있었다. 이 때 pH-different method로 구한 값이 beer-lambert law를 통해 구한 값보다 약간 컸는데 포도 과피 추출물을 측정했을 때는 오히려 pH-different method의 값이 작았다. 이는 포도 과피 추출물은 혼합물이기 때문에 안토시아닌 이외에도 빛을 흡수하는 물질들이 포함되어 있는데 pH-different method의 보정 없이 beer-lambert law 만을 사용할 경우 안토시아닌 이외의 물질이 빛을 일정 부분 흡수했더라도 안토시아닌이 빛을 흡수한 것으로 계산되기 때문에 beer-lambert law로 계산한 결과가 pH-different method를 사용한 결과보다 크게 나온 것으로 생각된다. 따라서 이 실험 결과를 통해 순 물질을 측정할 때는 beer-lambert law를 통해 충분히 높은 정확도로 물질의 농도를 구할 수 있지만 혼합물에서 특정 물질만의 농도를 구할 때는 물질에 따라 pH-different method와 같이 다른 보정방법이 필요함을 알 수 있었다.
VII. Reference
-NSF, Anthocyanin Content in Bilberry by pH-Differential Spectrophotometry
INA Method 116.000
-Isolation of Anthocyanin from Black Rice and Screening of its Antioxidant Activities
Correlation of two anthocyanin quantification methods:HPLC and spectrophotometric methods Jungmin Lee a,*, Christopher Rennaker a, Ronald E. Wrolstad b
-Principle of Modern Chemistry 6th Edition, Oxtoby, Thomson Brooks/Cole
-분광학의 이해, Pavia, 사이플러스
-Park, Young Sam et al, Isolation of Anthocyanin from Black Rice (Heukjinjubyeo) and Screening of its Antioxidant Activities, Kor. J. Microbiol. Biotechnol., Vol. 36 No. 1, 55-60, 2008
-Ronald E. Wrolstad, Characterization and Measurement of Anthocyanins by UV-Visible Spectroscopy, Current Protocols in Food Analytical Chemistry
-http://www.does.org/masterli/facsample.htm
-en.wikipedia.org/wiki/Ultraviolet-visible_spectroscopy
-en.wikipedia.org/wiki/Anthocyanin
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