pcr

목차

-PCR의 3단계-

1. DNA의 변성(Denaturation)

2. Primer의 결합(Annealing)

3. DNA의 합성(Polymerization)

RT-PCR (Reverse transcription PCR)

Real time PCR

Hybridization

SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism)

ISPCR (In Situ Polymerase Chain Reaction)

DDRT-PCR (Differential Display Reverse Transcriptase PCR)

본문내용

SSCP는 유전자의 돌연변이를 검색하는 유용한 도구로서 사용
ISPCR (In Situ Polymerase Chain Reaction)
PCR은 원하는 DNA를 대량으로 증폭시키는 방법이고, in situ hybridzation (ISH)은 세포나 조직에 존재하는 극미량의 DNA 및 RNA를 찾아낼 수 있음은 물론 원하는 유전자들의 위치 까지 확인할 수 있는 방법이다. ISPCR은 이 두가지 방법의 장점을 이용하여 응용한 방법으 로 PCR의 sensitivity와 ISH의 specificity를 고루 갖추고 있다.
DDRT-PCR (Differential Display Reverse Transcriptase PCR)
서로 다른 세포로부터 RNA를 분리한 후 특정하게 발현되는 mRNA를 찾아내기 위하여 T 염기 10개와 비특정염기 2개가 연결된 oligonucleotide를 primer로 이용하여 cDNA를 합성한 후 이 primer와 비특정 염기서열을 지닌 oligonucleotide를 primer로 이용하여 PCR을 하였을 때 나타나는 여러가지 PCR 산물을 비교함으로써 서로 다른 세포로부터 증폭된 PCR 산물에 차이가 있는지 없는지를 확인하는 방법

키워드

pcr,   DNA의 변성,   DNA의 합성