(결과) PCR (Polymerase Chain Reaction)

목차

1. PCR의 목적
2. DNA ladder의 패턴을 확인하여 PCR product의 size를 확인
3. DNA polymerase로 Taq polymerase를 사용하는 이유는?
4. dNTP의 역할
5. 고찰

본문내용

ucleotide라는 점이다.
5. 고찰
이번 실험은 소량의 DNA를 PCR을 이용해 증폭하고 전기영동으로 확인하는 실험이 있다. 전에 실험했던 결과를 보여주셔서 예측이 가능했으나 예측결과를 얻기는 쉽지 않다고 했다. 실험에 들어가는 물질들이 다 소량이고 종류가 많아서 헷갈릴 수 있었고 들어갔는지의 확인도 쉽지 않았다. 특히 0.2㎕의 양을 넣는 Taq polymerase는 더욱 어려웠다. 조교 분들이 말해준대로 물질을 넣을 때 소량이라 구분이 어려우므로 튜브 벽에 맺히도록 하여 구분을 짓고 Taq polymerase는 들어 갈 때 아지랑이처럼 나타나는 것을 확인하여 들어갔는지 유무를 확인 했다. 그리고 PCR을 한 후 전기영동으로 확인했다. 한 부분의 단편 DNA의 증폭을 한 것이기 때문에 전기영동 결과가 하나의 밴드만 진하게 형성이 되어야 하는데 밴드가 두 개가 형성이 되었다.
넣어준 두 개의 primer중 하나가 제대로 들어가지 않아 단일가닥의 DNA와 복제된 이중나선의 DNA가 남았을 가능성과 primer의 반응 중 DNA의 일부만이 증폭되어 계속적으로 그 부분만 증폭되었을 가능성도 생각이 된다. 전자의 경우 결과가 두 배의 size로 나타나는 것이 아닌 것으로 보아 후자의 경우가 더 가능성 있다고 생각된다. 어닐링의 온도나 이중나선의 모양의 차이로도 밴드가 두 개 이상으로 나올 수 있으나 이는 조교 분들이 설정해 준 상태를 이용하여 모두 같은 상태로의 실험이었기 때문에 이 문제가 원인은 아닌 것으로 생각된다. 결국은 나의 미숙한 pipet사용이 primer를 넣을 때 문제를 발생시킨 듯하다.

키워드

pcr,   Polymerase Chain Reaction,   결과보고서,   DNA