1. Preparation of culture media

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다.
Result
NA배지조성
Beef extra 3g/L
Peptone 5g/L
Nacl 8g/L
Agar 1.5%~2.0% 이므로 1L 중에는 15~20g이 있다.
실제 실험에선 500mL를 기준으로 했다. 따라서 실제로 넣은 양은
Beef extra 1.5g/500mL
Peptone 2.5g/500mL
Nacl 4.0g/500mL
Agar 7.5~10g/500mL
500mL를 기준으로 하면 배지가 16개 나온다.
일반적으로 Agar는 500mL에서 7.5g를 넣는다. 본 실험에서도 Agar를 7.5g 넣었다.
Discussions
NA배지 구성분들의 역할을 보면 agar은 고형화물질로의 최적의 조건을 몇 가지 가지고 있다. 하나는 약 90℃ 정도에서 녹지만 일단 녹으면 45℃ 가 될 때까지 고형화되지 않는다는 점이다. 따라서 끓는 물에서 녹은 후에는 사람의 손이나 미생물이 견딜만한 온도까지 식힐 수 있다. 그러므로 agar는 구성성분 중 맨 나중에 bottle에 넣어야 한다. 또 agar배지에서 자라는 미생물은 다양한 범위의 온도에서 배양이 가능하다. 또 대부분의 미생물은 agar을 분해하지 못하므로 agar은 훌륭한 고형화 물질이다. NaCl은 세균이 생육하는 데 필요한 무기염류의 역할을 한다. peptone은 육류, 카세인, 대두 가루, 젤라틴 및 다른 단백질 공급원을 부분적으로 가수분해하여 만들어진 단백질 가수분해 산물이다. 탄소, 에너지 및 질소 공급원으로 작용한다. beef extra는 지방을 제거한 쇠고기에서 추출한 수용성 추출물이다. 아미노산, 펩티드, 뉴클레오티드, 유기산, 비타민과 무기질 등이 들어 있어서 미생물에게 영양을 공급한다.
배지 만들 때 몇가지 주의해야할 것이 있다. agar는 시간이 지나면 굳기 때문에 NA배지의 구성성분 중 맨 나중에 첨가한다. 오염막기위해 수다를 지 않는다. 남은 시약은 물과 함께 두세번 넣으면 오차를 줄일 수 있다. 고압멸균기는 압력을 줘서 하는 것이기 때문에 압력을 높이므로 뚜껑을 꽉 닫으면 안된다.
References
Prescott 김영민 외 9인 옮김 / 일반미생물학 7판 / 라이프사이언스 / p. 107~114, 147~161 / 2008
생물공학실험서 / 한국생물공학회 편/ 자유아카데미/ p. 14 / 2000
배양공학/ 조문구/ 유한문화사 / p. 58, 137 / 2004
실험생물학/ 박원학/ 형설출판사/ p. 284 /1999

키워드

배지조성법,   멸균법,   무균조작법,   미생물,   A+