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4. Purpose : 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에
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DNA 용액을 무겁게 하여 아래로 가라앉히는 역할 .
- 파란색을 내는 bromophenol blue가 들어 있어서 전기영동하는 동안에 진행상태를 눈으로 보아 알 수 있게 한다.
실험방법
1> DNA 전기영동기를 ethanol로 세척한다.
Agarose Gel 만들기
2> 분리 하고
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DNA의 농도를 산출한다. 한편 단백질이 강하게 흡수하는 280nm에서의 흡광도를 측정하여 A260/A280의 비를 계산함으로써 단백질에 의한 오염상태를 추정할 수 있다.
3) DNA electrophorosis
분리한 plasmid DNA를 agarose gel에서 전기를 걸어 분리하면 크기
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DNA
7μl
10x H buffer
2μl
Enzyme
각 1μl
Total
20μl
Table 1. 반응 용액 만들기
(2) 37 ℃의 Incubator에서 1시간동안 반응시킨다.
(3) 전기영동기기에 Agarose gel을 넣고 TAE buffer (1X)를 gel이 잠길 때까지 채운다.
(4) Agarose gel의 첫 번째 홈에 DNA Ladder 10 μl를 loading
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DNA loading dye (bromophenol blue, xylene cyanol FF, Glycerol), EtBr, UV
3.
실험 목적
및
원리 목적 형질전환 된 E.coli의 cell로부터 plasmid DNA를 분리하고, 분광광도계를 이용하여 DNA의 농도와 순도를 분석한다. 또 agarose gel 상에서 electrophoresis 하여 목적하
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전기영동 이동거리로 분석한 결과와 일치한다.
agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다
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및 PCI/CI extraction 하는 이유 좀 알려주세요 // naver // kin.naver.com/
George M. Malacinski // 2006년 1월 30일 // Essentials of Molecular Biology fourth edition // p42-43 denaturation
전문진 // 2003년 8월 20일 // 현대의 생물공학과 생명공학 // p 69-71 PCR의 기본 원리
Watson, Baker,
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DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
1㎕
5' primer
1㎕
3' primer
1㎕
DW
17㎕
total
20㎕
< R E F E R E N C E >
1) Gene cloning and DNA analysis An Introduction, T.A.Brown, Fourth Editi
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2. '제2조선혁명노선’으로서의 선군사상
3. 선군정치와 핵무기, 그리고 민족공조
4. 북한은 핵을 포기할 것인가
5. 선군정치의 최후목표 - 김정일 통일대통령 만들기
제 5장 결어
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10가지 전략
3. 이력서 작성의 치명적인 실수 4가지
4. 주목받는 이력서를 만들기 위한 8가지 기법
5. 예제
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자기소개서 예제3
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6. 이력서 작성본
7. 영문자기소개서
8. 영문이력서
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"자신의 개성을 최대한 드러낼 수 있도록 자신만의 고유한 이력서를 갖는 것이 중요하다"고 말했다. 자기소개서(1-50 유형)
이력서 작성 노하우
면접 복장 코디하기
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튀는 이력서 만들기..
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