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장점이 있다. 하지만 감도가 낮고, 단백질 아미노산 조성에 따른 반응이 상이하며 환원당이 존재할 때 더 민감해지는 등의 단점이 있다.
9. Reference
최신 생화학, 김을상 外 6명, 신광문화사
단백질 실험노트(上), 김승호, 월드사이언스
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Bradford Assay
실험 목적
단백질 정량방법인 bradford method를 통하여
standard curve를 그리고, protein의
concentration을 측정한다.
실험 이론
1. 단백질 정량
단백질 정량은 알고자 하는 시료의 단백질의 양이나 농도를 정량적으로 알
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실험의 기질인 PNPP는 가수분해되면 노란색 화합물
인 p-니트로페놀을 생성하며, 이 변화를 통해 효소의 활성을 측정할 수 있다.
산성 탈인산가수분해효소는 pH 5.0 이하의 산성 조건에서 가장 잘 작용한다.
<투석(Dialysis)>
투석은 단백질
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정량의 산에 흡수시킨 후 이의 양을 적정 하여 생성된 암모니아의 양을 구하고 이 값에서 질소량을 구한다.
7. 참고문헌
http://www.happycampus.com/doc/4441808/?agent_type=naver
http://blog.naver.com/jiny202040?Redirect=Log&logNo=70132461866
8. 사진자료 1. 실험제목
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olution이 시료속에 들어있는 단백질들과 반응을 하면서 단백질이 많이 들어있을수록 점점 짙은 푸른색을 띄게 되는데 이로 인해 BSA양이 증가할수록 흡광도도 점점 증가하여 이번 실험에서는 전체적으로 이론값과 비슷하게 나온 것을 볼 수 있
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olution이 시료속에 들어있는 단백질들과 반응을 하면서 단백질이 많이 들어있을수록 점점 짙은 푸른색을 띄게 되는데 이로 인해 BSA양이 증가할수록 흡광도도 점점 증가하여 이번 실험에서는 전체적으로 이론값과 비슷하게 나온 것을 볼 수 있
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단백질에 대한 반응성이 감소하게 되는데, 따라서
실험이 1시간 이상 길어지게 되거나 시약을 보관했다가 다시 사용하는 경우에는 Standard
Curve도 다시 구해야하는 상황이 이르게 된다.
우리의 실험에서도 어느 정도의 시간적 간격이 있었으므
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단백질을 구성하고 있는 아미노산인 티록신 ·디옥시페닐알라닌 등의 페놀고리가 수은화합물을 만들고, 아질산에 의해 착색된 수은착염으로 되기 때문이다.
4) Xanthoprotein reaction
Aromatic amino acid (Try, Trp, Phe 등) 확인하는 실험방법이다. 색의 순
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dford stock solution:
① Coomassie brilliant blue G-250 100mg을 50mL 96% EtOH에 녹인다.(overnight).
② ①에 85% phosphoric acid 100mL을 가한후 증류수 850mL로 1L를 맞춘다.
*. Whatman filterpaper로 걸러준 후 갈색병에 넣어서 4℃에서 보관
3. 방법
① 시험관에 단백질 양
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기 때문이다.
위의 표가 오후반의 실험결과인데 교수님께서 4조와 6조의 결과가 가장 잘 나왔다고 하셨다. 이번 실험은 특히나 실패할 확률이 많은 어려운 실험인데 이번엔 괜찮은 결과가 나왔다고 하셨다. 실험을 할 때 중간에 잘못된 부분이
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