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단백질을 정량하는 방법이다. 이 방법은 단백질 종류에 따른 발색 차이가 적고, 계면활성제의 영향을 잘 받지 않으며 반응 생성물이 안정하다는 장점이 있다. 하지만 감도가 낮고, 단백질 아미노산 조성에 따른 반응이 상이하며 환원당이 존
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단백질 정량
단백질 정량은 알고자 하는 시료의 단백질의 양이나 농도를 정량적으로 알아내는 것
① Kjeldahl assay
② Lowry assay
③ BCA method
④ Bradford assay
2. Bradford Assay
1) 정의
UV-Visible spectrophotometer를 이용해 흡광도를 측정하여
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2. 토의
이번 실험을 하면서 우리는 여러 방면에서 오차가 발생했다. 첫 번째로 Standard의 흡광도값이 상승했다 내려간다는 점이다. 이 부분은 기기의 오류 때문에 생겼기 때문에 이를 감안한다면 R2 값이 1에 가깝게 나오지 않았을까 생각한다
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정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
★ Bradford Assay
원 리
- Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phr 에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다
- dye는 6개의 phenyl groups 과 2개의 sulfonic acid groups을 통해서 단백질과 결합
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단백질용액을 알칼리성 CuSO4와 반응시킨 후 흡광도를 측정하여 기준이 되는 검량선을 작성하고 단백질 농도를 측정하고자 하는 시료용액도 같은 방법으로 처리한 후 검량선으로부터 시료의 단백질을 정량하는 것이었다.
실험결과를 분석해
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