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흡광도를 계산, 계산된 흡광도 값을 display한다.
3.SDS-PAGE
1. SDS PAGE의 정의
SDS PAGE란 단백질을 그 크기에 따라 분리하는 방법이다.
(sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis)
2. SDS PAGE의 원리
샘플을 로딩하고 전기를 걸어주면 이온들은 (+)쪽
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단백질은 tyrosine 잔기를 함유하고 있기 때문에 280㎚의 흡광도를 측정한다면 그 값으로부터 단백질량을 계산할 수도 있을 것이다.
- 분자 내에 다중 결합 혹은 방향족 conjugation의 유무 및 그 정도를 알아볼 수 있기 때문에 눈에 보이지 않는 분
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단백질 함량을 구할 수 있다. 이 방법은 혼탁 시료에도 적용된다는 장점이 있다. 하지만 아질산 염, 시안화물, 히드라진의 유도체, 니트로 및 아조 화합물 등에 대하여는 수정이 필요하다. 질소생성물은 원래 시료에 결합되어 있던 상태에 따
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Protein_disulfide-isomerase
11) http://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/P09103.2
12) http://web.expasy.org/cgi-bin/protparam/protparam 유전자 재조합 단백질 정제 및 분석
Ⅰ 서 론(이론)
1. Cell culture
2. Harvest
3. Protein purification
4. Dialysis
5. Bradford
6. SDS P
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의 펩티드 결합과 접하면 1가 이온으로 환원이 되며 이를 ‘Biuret reaction’이라고 한다. 이는 뷰렛반응으로 보라색을 나타내는 것을 말한다. 실험방법은 다음과 같다.
1. 추출한 단백질을 BCA와 같이 튜브에 넣는다.
2. 흡광도를 측정하여 그 값을
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단백질들은 상대적으로 멀리까지 이동할 수 있어 이동 거리가 길다. 단백질의 전기영동 결과 α-synuclein의 이동거리가 LDH의 이동거리보다 짧아 α-synuclein이 LDH보다 큰 단백질이라는 것을 알 수 있다. 그리고 그 구체적인 크기값은 protein ladder를
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