<실험> UV-visible spectrophotometry를 이용한 단백질과 핵산의 분석

소개글

<실험> UV-visible spectrophotometry를 이용한 단백질과 핵산의 분석에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Introduction
《 UV-visible spectrophotometry (자외선 및 가시광선 분광법)》
《 전자의 들뜸 》
《 전자전이 》
《 발색단(Chromophore) 》

2. Materials & Methods

3. Results

4. Discussion
1) 파장에 따른 spectroscopy의 종류
2) 첫 번째 실험에서 같은 농도를 가진 아미노산임에도 불구하고, Arg이 다른 아미노산들에 비해 흡수파장이 낮은 이유?
※세가지 방향족 아미노산의 εMAX값이 서로 다른 이유?
3) 온도가 변함에 따라 DNA의 스펙트럼이 달라지는 이유?
※ 온도-흡광도 그래프에서 변곡점의 의미?
4) Cytochrome c의 산화-환원 형태에 따라 흡수파장이 달라지는 이유?
※ ferricytochrome c 와 ferrocytochrome c 의 농도 구하기
5) Spectrophotometric analysis의 활용

5. References

본문내용

e c은 산화된 형태의 Fe3+ 이고, ferrocytochrome c의 철이온은 전자가 하나 더 많은 환원된 Fe2+의 형태를 나타낸다.
※ ferricytochrome c 와 ferrocytochrome c 의 농도 구하기.
- A = εcl, ∴ c=A/εl
ferricytochrome c 의 농도
C= 0.071/ 2.1 × 104 M-1cm-1×1cm ≒ 3.4 ×10-6 M
ferrocytochrome c 의 농도
C= 0.086/ 2.99 × 104 M-1cm-1×1cm ≒ 2.9 × 10-6 M (520nm)
C= 0.169/ 2.99 × 104 M-1cm-1×1cm ≒ 5.7 × 10-6 M (550nm)
- sodium 환원제를 써서 시토크롬이 환원 되면서 농도가 변한 것을 볼 수 있다. 그런데ferrocytochrome c의 경우 흡수되는 두 부분에서 농도가 다르게 나왔다. 처음에는 같은 sample을 썼음에도 불구하고 파장에 따라 농도가 달라지는 점이 조금은 이해하기 힘들었다. 그러나 이것은 산화된 상태에 전자하나가 더해지면서 환원될 때에는 농도가 더 높았다가(550nm), 전자 하나가 빛의 흡수로 인해 들뜬 상태로의 전자전이가 일어나게 됨에 따라 환원효과가 줄어들어 ferrocytochrome c 농도도 줄어든 것이 아닌가 생각해 보았다.
5) Spectrophotometric analysis의 활용
- 많은 단백질은 tyrosine 잔기를 함유하고 있기 때문에 280㎚의 흡광도를 측정한다면 그 값으로부터 단백질량을 계산할 수도 있을 것이다.
- 분자 내에 다중 결합 혹은 방향족 conjugation의 유무 및 그 정도를 알아볼 수 있기 때문에 눈에 보이지 않는 분자의 구조를 예측할 수 있을 것이다.
- 환경적인 측면에서 유기오염물질의 흡광도를 측정하여 오염 현상을 신속하게 파악할 수 있는 기술을 개발하여 오염원 주변에서 미리 오염물질의 이동을 예방하는데 이용될 수 있을 것이다.
- 화장품 등에 들어가는 화학물질에 자외선 차단제를 개발하여 이용할 수 있을 것이다.
- 어떤 물질에 불순물이 들어있는지의 여부도 판단할 수 있을 것이다.
5. References (참고문헌)
Trudy Mckee and James R. Mckee. (2002) Biochemistry : the molecular basis of life-3rd ed. McGraw-Hill. pp. 300-306

키워드

UV-visible spectrophotometry,   분광법,   아미노산흡광도,   시토크롬,   자외선,   εMAX,   핵산분석,   단백질분석