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● 10X TBE 1L :
Tris 107.81g(0.89M) + EDTA 2.44g(0.02M) +Boric acid 55.0g(0.89M) + H2O (up to 1L)
⑤ sample DNA
⑥ EtBr (ethidium bromide) 용액
EtBr은 molecular work에서 가장 많이 가장 빈번히 사용되고 가장 위험한 물질이다. 이것은 uv에 노출되면 형광색으로 발광하며
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직임은 더욱 느려지므로 작은 DNA 분자까지 분리할 수 있게 된다. 아래의 여러 농도의 아가로스 겔에서 전기영동한 DNA 크기 표지자(ladder)들을 나타낸 다음 장의 그림을 보면 알 수 있듯이 1.5%와 1% 아가로스겔에서는 0.1kb의 DNA까지 분리가 되어
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지만 후자에 비해 분리해내는 능력이 떨어진다. 즉, 아가로스겔에 의해 분리된 밴드의 형태는 약간 모호하고, 밴드끼리 서로 멀리 떨어지는 경향이 있는데 이것은 아가로스 겔의 구멍이 상대적으로 크기 때문이다. 반면, 아크릴아미드겔의 경
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아가로즈 겔을 주로 사용하고 있다. 집속시킨 후 겔을 염색하고 그리고 또 다른 겔 기법은 이용하여 정량화한다. 원래의 IEF는 대부분의 다른 전기영동 기법과 마찬가지로 짧은 관의 겔(막대)에서 수행되었으나 평판(slab) 또는 얇은 막 형태가
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아가로오스 전기영동을 통해서 추출된 DNA의 양과 젤에서의 유전체 DNA의 양상을 조사한다. 나머지는 -20˚C 냉동실에 보관한다.
Amount of agarose in gel(%[w/v])
Efficient range of separation oflinear DNA molecules (kb)
0.3
5~60
0.6
1~20
0.7
0.8~10
0.9
0.5~7
1.2
0.4~6
1.5
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