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효소로부터 보호된다.
→ DNA가 복제될 때 새로이 복제된 DNA가닥은 methyl화 되있지 않으나 templated DNA가닥은 methylation 되어서 대부분의 제한효소에 의해 DNA duplex가 분해되는 것을 막기에는 충분하게 된다.
7)제한효소에 의한 DNA의 절단법
(1) 제한
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DNA의 가시화(Visualization)
(5) 전류
7) PCR(Polymerase Chain Reaction)
(1) PCR이란?
(2) PCR에 필요한 재료
(3) PCR의 원리
(4) PCR-RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)
3. 실험 방법
1)제한효소 처리
(1) Metrial
(2) Method
2) 전기영동
(1) Method
(2) Gel 염색
3) PCR
(1) PCR 반
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DNA절편이 생기기도 하고, 단면말단을 가지는 DNA절편이 생기기도 한다.
이와 같은 제한효소에 의한 DNA분자 내의 절단부위를 찾아내서 그림으로 표시해 놓은 것은 제한지도라고 한다. 제한지도를 작성하는 방법은 다음과 같다.
첫째, 선상 DNA
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효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2) 분광광도계( Spectrophotometer)
4. 실험재료
5. 실험방법
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필요할 때는 제 한효소 처리 중에 조금씩 덜어 전기 영동으로 monitor할 수도 있다.
2. 두 가지 제한효소를 이용한 DNA의 절단
두 가지 제한효소를 사용하는 경우는 다음과 같은 사항에 유의한다.
1) 우선 제한효소로 잘리는 부위가 너무 가깝지나
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