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맞춰준다. 측정하고자 하는 DNA를 증류수의 100배 희석해서 260nm에서 흡광도를 측정한다. spec size가 150일 경우O.D 측정 (Spectrophotometer) => DNA 1λ를 149λ의 ddH2O에 희석하여 측정한다. 260nm에서 1이면 50㎍/ml, {O.D 260nm} over {O.D 280nm} =1.8이면 pure DNA로
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DNA는 A260/A280 OD 비가 1.7이며 ss-DNA, RNA는 1.8이상의 값을 보이는데,이것으로 DNA의 순도도 알수가 있다.
실험 시에는 blank 를 잡아주기 위하여 증류수를 spec size에 맞게 넣은 후 blank=0으로 맞춰준 다음, 측정하고자 하는 DNA를 증류수의 100배 희석해
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영양 생화학 실험
실험일: 학번: 이름:
제출일: 실험조:
1. 주제 Plasmid DNA 분리 & DNA 농도 측정 & DNA gel electrophorosis
2.
재료
및
기구 기구 1) Plasmid DNA 분리
centrifuge, e.p tube, column(max 750ul), conical tube, pipette, vortex, collecting tube
2) DNA 농도 측
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DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
★ Bradford Assay
원 리
- Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 가 arg, trp, tyr, his, phr 에 결합시 흡광도의 변화를 측정한다
- dye는 6개의
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지고 이후 DNA는 완전히 분리된 상태로 존재하게 된다. 보통 260nm에서의 흡광도 증가가 최대값의 1/2에 도달했을 때의 변성온도를 DNA의 융해온도라 한다. DNA의 Tm은 생물종에 따라 다르고 G-C 함량이 많으면 Tm이 높게 나타나므로 Tm을 측정하면 G-C
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