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영양 생화학 실험
1. 주제 RT(Reverse Transcription)-PCR , PCR (polymerase chain reaction)
2.
재료
및
기구 기구 PCR, mini centri, PCR tube, e.p tube, incubator, micro pipette, glove, ice box.
시약 1) RT-PCR
DEPC, RNA sample, oligo dT, RT buffer, dNTP, RT enzyme., Thermal Cycler
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있다.
전기영동으로 RNA를 분리하는 방법은 denaturing agent에 따라 Glyoxal / DMSO(Dimethyl sulfoxide) 방법(McMaster & Carmichael, 1977)과 formaldehyde 방법(Rave et al, 1979)으로 나눌 수 있다. 각각의 장단점은 있지만, 여기서는 formaldehyde에 의한 것을 설명하였다. Tran
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RT-PCR Normalization” (Tang et al, 2007)에서는 β-actin은 PCR 증폭에 용이한 길이와 GC 함량을 가진 유전자로 소개하고 있다. 이를 통해 β-actin은 쉽게 측정 가능하며 House keeping gene으로서 적합하다고 생각할 수 있다.
Ⅴ.참고 문헌
·Kong et al, 2014, Identific
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RT-PCR(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction, 역전사효소-중합효소연쇄반응)을 이용하여 일본뇌염 바이러스에 특이적인 증폭 산물을 확인한다.
2) 혈청학적 검사: 일본뇌염 바이러스 감염에 대한 혈청학적인 진단은 병이 진행되는 동안 특이적인
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Reporter gene
Transfection efficiency
(Method)
(Result)
RNA interference (RNAi) technology
A. structure of siRNA, B. mechanism of RNA-interference
RT-PCR(P169),
Southern blotting
Northern blotting
Western blotting
Tag결합단백질(P177)
Reocombinant protein 정제: His-Tag
Protein Purificat
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