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제한효소는 l형 보다도 분자량이 훨씬 적고, 반응에는 Mg++를 필요로 한다. 이 효소는 DNA가닥의 4~8 염기를 인식하여 염기배열내 또는 주변의 일정 분위의 DNA 가닥을 절단 한다.
ll형 제한효소의 하나인 EcoR1은 위의 6염기를 인식하고, 화살표표시
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전기영동 전압을 0.5-1Volt/전극간거리 cm로 하여 긴 시간(12시간 정도) 실시하는 것이 바람직하다.
reference: http://blog.naver.com/raisonance
http://bioaio.com.ne.kr/ep.hwp 1.전기 영동법의 원리
2. 전기영동법의 종류
* DNA(or RNA) 전기영동
* 단백질 전기영
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제한효소를 생산한다면, 이름은 Roman numeral Ⅰ으로 끝난다. 만약 한 개보다 더 많은 효소가 생산되어진다면, 발견된 순서에 따라 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ 등으로 수가 메겨진다.
< 제한효소와 리가아제의 이용 방법 >
- 제한효소를 통해 DNA에서 원하는 부
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DNA를 바로 합성시킨다. mRNA또는 cDNA를 탐침으로 사용.
생명체의 발생과정에서 각 단계에 발현되는 유전자가 어떤 것인가에 대해 답할 수 있다. 두 가지 다른 발생 단계의 세포로부터 대응하는 mRNA를 분리하여 역전사효소와 형광 표지된 deoxynuc
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전기영동의 정의와 원리
(2) 완충액
(3) Gel loading buffer
(4) DNA의 가시화(Visualization)
(5) 전류
7) PCR(Polymerase Chain Reaction)
(1) PCR이란?
(2) PCR에 필요한 재료
(3) PCR의 원리
(4) PCR-RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)
3. 실험 방법
1)제한효소 처리
(1) Metri
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DNA의 정량
A. 단백질의 정량
1) Bradford assay
2) Lowry method
B. DNA의 정량과 순도 측정
2. 단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
3. LD
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DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
- 박효근(1984)동위효소 분석법에 의한 무우 종자의 순도 검정. 서울대학교 1-27
- 이지은, 김성길(2009) DNA marker를 이용한 멜론의 일대잡종품종 순도검정. 1-5
- 김두환 DNA marker를 이용한 F₁순도 검정. 한국원예학
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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법을 설명하라
♦ 벤젠에 대해
♦ 벤젠이 평면에 있는지 없는지에 대해
♦ 산염기 개념
♦ 엔트로피와 엔탈피에 대해 설명하시오.
♦ 양자역학
♦ 몰농도와 몰랄농도
♦ DNA염기쌍의 상보적 결합, 그 결합의 종류
b
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