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목적
DNase 생성유무 관찰
임상세균에서 병원성 포도상 구균의 동정하기 위한 보완 검사를 한다.
실
험
원
리
1.배양된 균의 분해 여부에 따라 균주를 분리
2.DNA 분해효소 - DNase 생성 유무를 시약반응 과정을 통해 판독한다.
3.Toluidine blue가 배지
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Dnase를 억제하기 위해서이다.
7)Dnase
뉴클리아제(nuclease)는 핵산을 해중합(depolymerization)시키는 효소이다. 대부분 뉴클리아제는 화학적 특이성을 가지고 있으며 크게 Dnase와 Rnase로 나눈다. 대부분 Dnase는 단일가닥 DNA또는 이중가닥 DNA중 어느하
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DNaseI 2㎕. gDNA+DNaseI 10㎕. gDNA+물 300㎕+sonication+Ethanol 600㎕+Sodium acetate 30㎕ 순서이다. 전체적으로 DNA가 밑으로 쭉 끌리는 모양을 얻을수 있었고 sonication을 한 것에서는 위 아래에 진한 밴드가 나뉘어서 관찰되었다. 또한 DNase 2㎕를 처리 했을 때
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DNase 처리 결과, 예상했던 대로 DNA가 완전히 분해되면서 band가 나타나지 않았고 가장 아래의 RNA는 다른 실험과 마찬가지로 흐리게 나타남을 볼 수 있었다. 핵산의 backbone은 강한 radiation이나 UV에 의해 phosphodiester bond가 끊어지기 때문에 size가 작
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DNase I에 대한 감수성도 증가된다. DNase I에 의한 감수성이 높은 부위를 DNase I hypersensitive site라고 한다. 이 부위는 뉴클레오솜이 없는 구조이기 때문에 전사조절 단백질, RNA 중합효소가 쉽게 접근하여 전사가 증가된다.
(3) 전사후 단계에서의 유
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