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Lowry method 에서는 Folin 시약을 넣을때 30초 간격으로 넣어주고 정확히 45분뒤에 다시 30초 간격으로 순서대로 흡광도를 측정해 주어야하는데 이것을 정확하게 하지 않아서 오차가 커진 원인이 되었을 가능성도 있다.
이번 실험은 지난번 실험이
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Lowry 실험의 장점과 단점*:Lowry 방법은 단백질의 아마이드 결합에 의한 구리이온의 환원을 토대로 측정하는 방식이다. (Cu2+ --> Cu1+) 따라서 위 Bradford방법보다는 단백질간의 차이가 거의 없는 정확도를 보여준다. 단점으로는 여러가지 준비시
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형성하며 peptide 분자와 결합해서 염기조건에서 착체를 형성한다.)
이때 형성되는 착화합물의 양은 단백질의 농도에 따라 달라지기 때문에 각각의 서로다른 농도를 지니는 표준단백질용액을 알칼리성 CuSO4와 반응시킨 후 흡광도를 측정하여
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Lowry, Bradford와 같이 sensitivity가 높고, 간단하다. 또한 Triton과 SDS 같은 detergent가 1%정도 존재하더라도 반응이 잘 일어난다.
3) Bradford method
Biuret method, Lowry method의 단점을 보완한 단백질 정량법으로서, Coomassie Brilliant Blue dye가 단백질과 결합하게
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bradford method를 통하여
standard curve를 그리고, protein의
concentration을 측정한다.
실험 이론
1. 단백질 정량
단백질 정량은 알고자 하는 시료의 단백질의 양이나 농도를 정량적으로 알아내는 것
① Kjeldahl assay
② Lowry assay
③ BCA method
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