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주형이 된다. 작은 분자는 보다 효과적으로 증폭되므로 그것이 PCR의 생산물의 대부분을 접하게 되고, 목적하는 주형 DNA상의 프라이머로서의 역할을 다하지 못하게 된다.
- 프라이머의 조건
많은 경우 프라이머의 염기서열은 주형 DNA와 완벽
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Mg2+ 농도는 PCR을 실행할 때 다음의 사항에 관여하고 있는 것으로 여겨진다. ① 효소활성, ② primer의 annealing, ③ 합성된 DNA의 충실성, ④ primer-dimer의 형성 등이 있다. 킬레이트제(예를 들면 EDTA)는 반응액 속의 Mg2+ 농도에 영향을 미치므로 주형
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DNA polymerase가 70℃ 이상에서 반응하도록 하여야 하며, 그 때문에 Taq DNA polymerase,Mg2+, primer를 온도가 상승한 후에 첨가하여 반응을 시작하는 방법이 고안되었다. 이러한 방법을 Hot start PCR이라고 부른다. 이 방법을 사용하면 비특이적 반응이 적
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Taq polymerase는 그 기능은 유지한다. 그리하여 PCR시 Taq polymerase를 사용한다.
우리는 35번의 cycles을 돌려 얻고자 하는 DNA를 증폭시켰다. 각 Cycle이 돌아지면서 각 과정마다 원하는 온도가 있다. 95℃에서는 주형 DNA를 변성시켜 이중나선을 풀어준
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PCR을 실행할 때 다음의 사항에 관여하고 있는 것으로 여겨진다. ① 효소활성, ② primer의 annealing, ③ 합성된 DNA의 충실성, ④ primer-dimer의 형성 등이 있다. 킬레이트제(예를 들면 EDTA)는 반응액 속의 Mg2+ 농도에 영향을 미치므로 주형으로 사용하
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