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PFGE 에 비하면 아직 낮다.
g. Nucleotide sequence analysis
이것은 염색체 DNA 혹은 rRNA의 염기서열을 직접 비교하는 방법이다. 일반적으로 클로닝 혹은 PCR 등에 따라서 증폭한 일부분을 비교해소 사용한다. 이 방법은 세균 분류학에서 자주 이용되는 방
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4인. 2009. 닭에서 분리한 salmonella gallinarum의 약제내성 및 PFGE 양상. 한국가축위생학회지, p.156.
Schwartz DC외 1인. 1984. Separation of yeast chromosome-sized DNAs by pulsed field gradient gel electrophoresis. Cell. P.6775.
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free flow zone electrophoresis), 모세관 전기영동(capillary electrophoresis) 등이 있다.
이동 경계면 전기영동은 U자형 튜브의 완충용액 안에서 수행되며, 전기영동을 마친 후에는 굴절률(refractive index)의 변화로 시료가 어디에 있는지 검출할 수 있다. 장치
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gel에서 분리하기가 힘들다. 이 때 orthogonal field alternation gel electrophoresis (OFAGE)가 사용되는 데 이 전기영동법을 설명하라.
OFAGE 그리고 CHEF(Contour Clamped Homogeneous Electric Fields), FIGE(Field Inversion Gel Electrophoresis)같은 관련된 기술들은 매우 중요한다.
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Electrophoresis (전기영동)
Electroporation (전기천공법)
End-filling
Endonuclease
Episome
Ethanol precipitation (에탄올 침전법)
Ethidium bromid (EtBr)
Exonuclease (핵산말단가수분해효소)
Expression Vector
Fermenter
Field inversion gel electrophoresis(FIGE)
Fluorescence in situ
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전기영동 이동거리로 분석한 결과와 일치한다.
agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다
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갔을 경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했
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