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Plasmid DNA의 크기를 확인 한다.
5. 참고 문헌
- https://cafe.naver.com/biofactacademy/76 (바이오팩트 공식 학술카페) - Plasmid prep
- [네이버 지식백과] 플라스미드 [Plasmid] (분자·세포생물학백과)
- 김명원 외 9명, 생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSON, 186pag
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DNA 용액을 무겁게 하여 아래로 가라앉히는 역할 .
- 파란색을 내는 bromophenol blue가 들어 있어서 전기영동하는 동안에 진행상태를 눈으로 보아 알 수 있게 한다.
실험방법
1> DNA 전기영동기를 ethanol로 세척한다.
Agarose Gel 만들기
2> 분리 하고
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Plasmid DNA 분리와 전기영동
<그림4. 전기영동 결과>
전기영동 결과 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅳ. 논의
플라스미드 DNA는 박테리아와 일부 균에 존재하는 염색체 이외의 DNA 로 ‘작고 스스로 복제하는 두 가닥의 환형의 DNA’라 정의할 수 있다. 플
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DNA를 변형시키는 효소들은 magnesium과 같은 2가 이온을 필요로 하므로 EDTA 를 조금 넣어주면 이런 효소들로부터 DNA를 보호할 수 있습니다.
DNA가 눈에 보이기도 하고 양이 적으면 잘 보이지 않기도 합니다. 그러나 상당히 순수한 plasmid DNA가 분리
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Plasmid DNA 분리 (이온 교환 크로마토 그래피)
형질전환 된 E.Coli cell로부터 plasmid DNA를 재분리 하고자 하는 실험으로서, plasmid preparation method에는 alkali lysis법, boiling법, 효소 분해법 등이 있다.
형질 전환 균주가 갖고 있는 플라스미드에 존재
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plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되
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DNA이고, 많이 이동한 오른쪽 DNA 가 제한효소 처리를 하지 않은 자연상태의 초나선구조 DNA 이다.
Ⅳ. 참고문헌
-「생화학」, Karlson, 김태봉역, 탐구당, 1985, p72.
-「생물학 개론」, 안상태, 화학사, p136-140.
-「Duplex SDS-PAGE를 이용한 단백질 분리향
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분리 또는 합성하여 유전자를 재조합하거나 재조합된 새로운 유전자를 세균 등에 도입하여 특정한 생물활성물질을 다량으로 저렴하게 생산하게 할 수 있어서 이미 선진국들은 이의 실용화를 위하여 크게 투자하고 있다. 유전공학의 발전은
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