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Plasmid DNA의 크기를 확인 한다.
5. 참고 문헌
- https://cafe.naver.com/biofactacademy/76 (바이오팩트 공식 학술카페) - Plasmid prep
- [네이버 지식백과] 플라스미드 [Plasmid] (분자·세포생물학백과)
- 김명원 외 9명, 생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSON, 186pag
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DNA 추출 용액과 섞은 뒤 두 번째 홈에 loading한다.
(16) 100 V의 전압에서 1시간동안 전기영동을 진행한다.
(17) Agarose gel을 꺼내 UV transilluminator위에 놓고 자외선을 쬐어 Plasmid DNA의 크기를 확인 한다.
※ 실험 시 유의사항
- 원심분리시킬 때 micro t
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plasmid DNA를 분리해내는 실험으로 실험을 통해 각각의 buffer가 사용되는 이유를 알 수 있었고 전기영동 장치로 얻어진 DNA를 확인할 수 있었다.
4. 참고문헌
(1) http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_ligase
(2)http://blog.naver.com/withcoffee67?Redirect=Log&logNo=70160635571&nbs
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dna%EB%A5%BC-%ED%9A%8C%EC%88%98%ED%95%9C-%EB%82%A8%EC%9E%90/
그림 3 :
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=wldmsqkqn1&logNo=150100608787&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.co.kr%2F
그림 4 : http://biochemistry.yonsei.ac.kr/sub/catalog.php?CatNo=13&gene=18
그림 5 :
https://www.slideshare
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분리 → take soup
12. add same volume of chloroform
13. 10′, 천천히 돌린다 →4,000rpm 5′원심분리 → take soup
14. add two volume of cold EtOH
15. DNA를 glass rod로 건져낸다.
16. foil로 rod를 닦아낸다.
17. Dry foil
18. TE에 dissolve
19. gel running
result
- pGFP plasmid isolation
- PCR
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DNA를 흡수 할 수 있는 능력을 가질 수 있다. 아직 DNA 흡수 기작은 밝혀지지 않았지만 칼슘 이온이 DNA의 음전하를 막아 DNA가 세포막을 통과할 수 있게 된다. 따라서 칼슘이온을 처리해 genetic competence를 갖게 한 E.coli를 competent cell 이라 한다. Watso
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