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를 인식하려면 염기가 몇 개 옆에 더 붙어있어야 된다.
또한, Open reading frame (ORF)은 주어진 reading frame에서 stop codon을 가지지 않는 DNA sequence로서 실제로 mRNA에서 단백질이 발현되는 부분이다. primer는 개시점과 종결점에 각각 특이적으로 결합시
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Taq이 primer-dimer의 발생빈도도 낮습니다.
여러가지를 적었지만 PCR에서 최상의 결과는 90%이상, 아니 99%까지 primer에 의해 결정됩니다.
- Template의 양을 좀더 조절해보시는 것도 한 가지 방법일거 같네요
같은 primer라고 할지라도 100% specific한거
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Mg2+ 농도는 PCR을 실행할 때 다음의 사항에 관여하고 있는 것으로 여겨진다. ① 효소활성, ② primer의 annealing, ③ 합성된 DNA의 충실성, ④ primer-dimer의 형성 등이 있다. 킬레이트제(예를 들면 EDTA)는 반응액 속의 Mg2+ 농도에 영향을 미치므로 주형
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【과정】
<1 cycle>
+- step 1 변성(denaturation) : dsDNA→ssDNA로 풀어주는 과정
+- step 2 결합(annealing) : target template에 primer가 결합하는 과정
+- step 3 연장(extension) : primer에서부터 template에 대응하는 nucleotide
를 합성하는 과정
Den
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Primer F, R을 넣는데 찾아보니 F는 forward의 첫 자이고, R은 Reverse의 첫 자이다. 두 개의 프라이머는 DNA가 이중가닥이기 때문에 필요하다고 한다.
가설인‘micropipet은 부피를 측정할 때 쓰는 도구일 것이다.’처럼 액체의 부피를 측정할 때 피펫 중
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primer
1㎕
3\' primer
1㎕
DW
17㎕
total
20㎕
< R E F E R E N C E >
1) Gene cloning and DNA analysis An Introduction, T.A.Brown, Fourth Edition
2) Size marker
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primer design을 진행하였고, pcr 및 SLIC method를 활용한 뒤에 transformation과 IPTG 처리를 배웠습니다. 그 후 Ni-NTA colum 실험과 SDS-PAGE 후 TagX 단백질의 크기를 비교하여 발현 온도에 따른 binding affinity를 비교하는 연구에 참여하여 실험하였습니다.
더불
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