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여 있을 가능성과 resin에 binding하지 못하고 그냥 쓸려 내려온 Taq polymerase 두 가지 경우로 예측되며, 그 양이 생각보다 많았다(약 1 ㎍). 지난 주 실험에서도 F.T.의 양이 생각보다 많았었는데, 이는 purification이 덜 진행되었기 때문에 발생하는 unde
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Taq DNA polymerase의 최적 활성 온도인 72-74℃에서 DNA 합성을 일어나게 한다. 이상의 cycle을 20번 반복하면 두 primer 사이의 DNA fragment의 수가 기하급수적으로 증가하여 220 (1,048,576)배로 늘어나게 된다.
<<Polymerase Chain Reaction의 원리>>
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- 그러나 혼합 primer or mismatch를 갖는 primer를 사용할 경우는 37~45 ℃로 annealing 온도를 낮출 필요가 있다.
(3) Extension(신장반응) PCR 정의
PCR 증폭효율에 영향요인
PCR 반응조건
반응액의 조성
Taq(Taq polymerase)
Agarose gel electrophoresis
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Taq이 primer-dimer의 발생빈도도 낮습니다.
여러가지를 적었지만 PCR에서 최상의 결과는 90%이상, 아니 99%까지 primer에 의해 결정됩니다.
- Template의 양을 좀더 조절해보시는 것도 한 가지 방법일거 같네요
같은 primer라고 할지라도 100% specific한거
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Taq polymerase는 그 기능은 유지한다. 그리하여 PCR시 Taq polymerase를 사용한다.
우리는 35번의 cycles을 돌려 얻고자 하는 DNA를 증폭시켰다. 각 Cycle이 돌아지면서 각 과정마다 원하는 온도가 있다. 95℃에서는 주형 DNA를 변성시켜 이중나선을 풀어준
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