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Plasmid DNA (Hemoglobin)를 직접 transformation 해보았고, 결과로써 LB Plate에 형성된 colony를 확인하였다. 1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ Transformation (형질전환)
■ Competent cell (수용세포)
■ Vector (벡터)
■ 플라스미드 (Plasmid)
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plasmid는 supercoiled형태를 가짐으로써 PH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는 것을 이용하여 순수한 plasmid만을 추출하는 구조적 기본원리에 의한 방법이다.
방법Bacterial culture tube에 LB(일반영양배지 Luria Bertani) broth(액체
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plasmid는 supercoiled형태를 가짐으로써 PH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는 것을 이용하여 순수한 plasmid만을 추출하는 구조적 기본원리에 의한 방법이다.
방법Bacterial culture tube에 LB(일반영양배지 Luria Bertani) broth(액체
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실험 목적
Plasmid DNA의 구조적 특징을 이해하고 이를 이용하여 Plasmid DNA를 Purification한다.
DNA Purification 한 것을 전기 영동을 통해서 DNA를 크기 별로 분리하여 확인한다.
Plasmid DNA
Bacteria내에서 Chromosomal DNA와는 별도로 발견되는 작은 DNA, Ch
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ion으로 SDS에 의해 cell membrane 단백질의 고유 전하가 변하 고 lipid가 제거되어 cell이 깨지게 되며 NaOH로 인하여 PH가 급격히 상승함에 따라 bacteria의 chromosomal DNA는 변성되어 분리 되고 supercoiled plasmid는 일부만 영 향을 받는 형태로 존재하게 된다.
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