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Ⅰ. Objective
Cell migration assay의 다양한 기법 중 transwell migration assay(Boyden chamber assay)를 사용하여, 서로 다른 농도의chemokine에 의해 유도된, T lymphocyte의 migration을 양적으로 분석(quantitative analysis)하고자 한다. 이때의 chemokine으로는 human SDF1α가, T ly
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assay)을 실시하게 된다. 여기에는 test하고자 하는 물질의 특성에 따라 여러 가지 검정법(cornea assay, air sac accay 등) 이 이용가능하나 일반적으로 세포증식(cell proliferation), 세포부착(cell attachment), 세포이동 및 침윤(cell migration and invasion), 혈관형성
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세포의 농도를 반영한다. 즉, OD값은 살아있는 세포의 수와 비례한다.
그래프에서 볼 수 있듯이 배양 후 24시간 후 MTT Assay를 시행한 Plate 2의 cell인 day0는 OD값이 0.054, 공Vector인 pcDNA3.1을 넣은 pc는 OD값이 0.101, syndecan-1 cDNA를 넣은 sdc의 OD값은 0.172
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I. 실험 목표
MTT assay는 세포의 증식능을 분석하는 실험 기법으로, 세포의 대사에 관여하는 미토콘드리아 내 NADH-dependent cellular oxidoreductase enzyme을 통해 MTT가 formazan으로 환원되는 원리를 이 용한다. 해당 실험은 배양한 세포 수를 직접 계산한
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5.1 Bradford
5.2 UV spectrophotometry
6. SDS PAGE
6.1 PAGE gel 조성 및 준비과정
6.2 PAGE 만들기
6.3 Loading
6.5 Staining , Destaining , Dry
Ⅲ 결 과
1. Cell culture
2. Bradford
3. UV assay
4. SDS PAGE
Ⅳ 토 의
Ⅴ 참고문헌
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